窒息死大鼠腦組織iNOS的表達及法醫(yī)學意義.pdf

1、背景及目的：機械性窒息死是兇殺案件中最多見的死因之一，大多數(shù)案件可通過現(xiàn)場勘驗、尸體內(nèi)外部征像可確定機械性窒息死。但少數(shù)案件現(xiàn)場遭受破壞或痕跡不清，尸體內(nèi)外部無特異征象，難以判定為機械性窒息死。根據(jù)機械性窒息的機制，腦是受到損傷最為嚴重的內(nèi)部器官，且死后腦組織完整不易受到破壞。檢測某些物質在機械性窒息死腦組織中的特異性變化，為推斷機械性窒息死提供一定科學依據(jù)。 iNOS是一氧化氮合酶的一種亞型，在生理狀態(tài)下不表達或微量表達；當機

2、體受到炎癥、缺血缺氧、損傷、紫外線等刺激后，能在相應病變的組織或器官大量表達，并呈一定的時間規(guī)律性。本實驗主要研究大鼠窒息死組與其它死亡組腦組織中iNOS的表達規(guī)律，并探討其在機械性窒息死因推斷上的法醫(yī)學意義。 方法：1、動物模型：實驗動物來源于重慶醫(yī)科大學動物實驗中心飼養(yǎng)的健康清潔的SD大鼠80只，按照隨機的原則將大鼠分為機械性窒息死亡組、失血性休克死亡組、腦挫裂傷死亡組及斷頸死亡組。大鼠頸部放入尼龍繩的活套內(nèi)，背對活結，依靠

3、大鼠自身重量使活套拉緊，造成頸部壓迫窒息死亡模型；用10g砝碼從20CM高度，在導管內(nèi)自由落體垂直打擊硬腦膜，建立腦挫裂傷死亡模型；分離出雙側頸動脈，剪斷放血至休克死亡模型；用一手拇指和食指用力往下按住鼠頭，另一只手抓住鼠尾，用力向后上方拉動，造成脊髓橫斷致斷頸死亡模型；2、取材：在各組死后不同時間點在大腦中部作橫切面切取0.4CM腦組織；3、對所取材腦組織石蠟切片進行HE染色光鏡觀察：4、采用免疫組織化學染色法進行iNOS染色；5、使

4、用SPSS 13.0軟件包對所得數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析。 結果：各組Oh的染色和同組各時段相比陽性染色稍底，同一組染色結果在(6h、12h、24h)各時間點上沒有顯著染色差別，機械性窒息死亡組在大腦灰質神經(jīng)元胞漿內(nèi)染色深，呈明顯棕黃色，基本上累及整個視野所有神經(jīng)元的胞漿與失血性休克死亡組和腦挫裂傷死亡組及斷頸死亡組有顯著染色差別；失血性休克死亡組和腦挫裂傷死亡組神經(jīng)元胞漿內(nèi)染色較深，在整個視野中大部分的神經(jīng)元胞漿受累及，兩組間無明顯