慢性飲酒對(duì)大鼠大腦中動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞BK通道電流的影響及維生素C的保護(hù)作用.pdf

1、目的：研究慢性飲酒對(duì)大鼠大腦中動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞（middle cerebrAlartery smooth muscle cell, MCASMC）大電導(dǎo)鈣激活鉀通道（high-conductance Ca2+-activated K+channel, BK通道）電流的影響及維生素C的保護(hù)作用。
　　 方法：備動(dòng)物模型，將健康雄性SD大鼠隨機(jī)分為三組：正常對(duì)照組，飲酒組和維生素C組。對(duì)照組大鼠自由飲水；飲酒組大鼠前12周按2～4g/

2、(kg·d)的濃度自由飲酒，后8周自由飲用含20％（V/V）酒精的水，共飲酒20周；維生素C組是在飲酒組大鼠所飲酒水的基礎(chǔ)上加入0.05％（W/V）的維生素C片，溶解后飲用20周。急性酶解法分離大鼠MCASMC，利用全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)記錄BK通道的電流，觀察慢性飲酒對(duì)大鼠大腦中動(dòng)脈 BK通道電流的影響及維生素C的干預(yù)作用。
　　 結(jié)果:兩步酶解法分離得到大鼠MCASMC，細(xì)胞多呈梭形，膜表面光滑，輪廓清晰，其外形在對(duì)照組、飲酒組和

3、維生素C組之間無顯著差異。電壓鉗模式下測(cè)定三組大鼠MCASMC膜電容，分別為15.33±1.36 pF、13.50±1.96 pF和13.44±3.20pF，各組之間均無顯著差異（P>0.05）。階躍方波脈沖方案，鉗制電位-80mV，從-60mV 起以10mV階躍除極至+80mV，測(cè)試500ms，采樣間隔5s，采樣頻率5kHz。繪制電流-電壓關(guān)系曲線，結(jié)果證實(shí)BK通道電流呈電壓依賴性，從+20mV開始呈明顯的外向整流特性。記錄BK電流，

4、測(cè)試比較不同膜電位下大鼠BK通道的電流情況，從+40mV開始除極至+80mV，飲酒組與對(duì)照組相比，大鼠MCASMC BK通道電流均顯著下降；從-60mV至+80mV，維生素C組與飲酒組相比電流均顯著升高，此外在+10mV和+30mV，維生素C組比對(duì)照組也有顯著升高（P<0.05）。在單電壓60mV脈沖刺激下得到大鼠MCASMC的BK通道電流值，飲酒組較對(duì)照組顯著降低（5.271.27pA/pFvs17.54±±7.77pA/pF，P<0

5、.01），維生素C組較飲酒組顯著升高（14.446.36pA/pFvs5.27±±1.27pA/pF，P<0.05）。采用斜坡脈沖方案，從-50mV連續(xù)除極至+100mV時(shí)電流達(dá)最高，記錄并比較峰值電流，飲酒組較對(duì)照組顯著降低（9.911.94pA/pFvs30.18±±10.67pA/pF，P<0.01），維生素C組較飲酒組顯著升高（24.198.72pA/pFvs9.911.94pA/pF，P<0.05）?！馈?br>　　 結(jié)論：