孕期硝酸鑭暴露對(duì)仔代大鼠免疫功能的影響.pdf

1、目的：
　　1.研究硝酸鑭是否可以通過(guò)胎盤屏障進(jìn)入仔代大鼠體內(nèi)，母鼠與仔鼠經(jīng)“血-胎盤屏障”內(nèi)暴露標(biāo)志物的相關(guān)性。
　　2.開展一代繁殖毒性擴(kuò)展試驗(yàn)，探討孕期染毒硝酸鑭對(duì)仔代大鼠體液免疫、細(xì)胞免疫、非特異性免疫功能的影響，為制定食品中稀土元素的每日允許攝入量（ADI）和稀土的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：
　　參考一代繁殖毒性擴(kuò)展實(shí)驗(yàn)（OECD443）的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行發(fā)育免疫毒性實(shí)驗(yàn)，選擇健康成年SD大鼠，按雌雄1

2、:1的比例合籠，每日觀察陰栓確定受孕情況，獲得40只孕鼠，將孕鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、低劑量組、中劑量組、高劑量組，每組10只，于妊娠第7天至第16天每日灌胃給予硝酸鑭水溶液，劑量分別為0、2、20、60 mg/kg BW，對(duì)照組灌胃給予等量蒸餾水，灌胃量為10 ml/kg BW。仔鼠出生后第4天（PND4）進(jìn)行窩標(biāo)準(zhǔn)化，使每窩仔鼠數(shù)目均為4只，雌雄各半，電感耦合等離子體質(zhì)譜法（ICP-MS）檢測(cè)母鼠、仔鼠全血中鑭元素含量。斷乳后仔鼠分籠喂養(yǎng)

3、，每窩選取雌雄各一只作為A隊(duì)列，另每窩選取雌雄各一只作為B隊(duì)列。其中A隊(duì)列80只仔鼠出生后第52天（PND52）觀察主要臟器臟體比和組織病理學(xué)，用流式細(xì)胞儀檢測(cè)外周血淋巴細(xì)胞分型以及血清IL-1α、γ-IFN、IL-10、IL-4、TNF、IL-2含量；B隊(duì)列80只仔鼠于出生后第55天（PND55）取脾進(jìn)行抗體生成細(xì)胞測(cè)定（即空斑實(shí)驗(yàn)）以及淋巴細(xì)胞增殖能力測(cè)定。整個(gè)試驗(yàn)期間觀察并記錄孕鼠周體重、周進(jìn)食量，仔鼠周體重、周進(jìn)食量。試驗(yàn)結(jié)果采

4、用SPSS19.0軟件進(jìn)行單因素方差分析，BMDS軟件分析其劑量效應(yīng)關(guān)系。
　　結(jié)果：
　　1.孕鼠體重隨妊娠時(shí)間的延長(zhǎng)逐漸增加，處理組與對(duì)照組在孕期不同階段無(wú)明顯差異（P＞0.05）。母鼠妊娠期進(jìn)食量和總食物利用率處理組與對(duì)照組比較無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。
　　仔鼠出生后體重迅速增加，各劑量組之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。斷乳后仔鼠每周進(jìn)食量處理組與對(duì)照組比較無(wú)顯著性差異（P＞0.05），但硝酸鑭中、高劑量組的雌性仔代大鼠

5、在出生后第五周的食物利用率低于對(duì)照組（P＜0.05）。硝酸鑭各劑量組主要臟器臟體比與對(duì)照組比較無(wú)顯著差異（P＞0.05）。病理結(jié)果顯示部分肝臟細(xì)胞脂肪變性、小葉內(nèi)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，腎臟炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，但各組出現(xiàn)的比例無(wú)差異，其他臟器無(wú)明顯病理改變。
　　2.母鼠全血中鑭元素含量三個(gè)劑量組均高于對(duì)照組（P<0.05）；仔代雄性大鼠全血鑭元素低、中、高劑量組均高于對(duì)照組（P<0.05）；仔代雌性大鼠全血鑭元素中、高劑量組高于對(duì)照組（P<0.

6、05）。
　　3.雄性仔鼠高劑量組ConA誘導(dǎo)脾T淋巴細(xì)胞增殖能力明顯高于對(duì)照組（P<0.05）；空斑形成個(gè)數(shù)各劑量組之間無(wú)差別（P>0.05）。
　　4.雌性仔鼠全血NK細(xì)胞百分比各劑量組均高于對(duì)照組（P<0.05），CD4/CD8、T細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞所占百分比與對(duì)照組比較無(wú)顯著性差異（P>0.05）。
　　5.仔鼠各劑量組血清細(xì)胞因子水平與對(duì)照組比較無(wú)顯著差異（P>0.05）。
　　6.BMDS軟件分析T淋巴

7、細(xì)胞增殖能力、NK細(xì)胞得出，劑量組之間存在劑量效應(yīng)關(guān)系，基準(zhǔn)劑量下限（BMDL）為0.21 mg/kg BW。
　　結(jié)論：
　　1.硝酸鑭可以通過(guò)胎盤屏障進(jìn)入仔代大鼠血液中，仔鼠血液中鑭元素與母鼠血中鑭元素水平有劑量效應(yīng)關(guān)系。
　　2.孕期經(jīng)口暴露硝酸鑭可以影響仔代大鼠細(xì)胞免疫功能，使T淋巴細(xì)胞增殖能力增強(qiáng)，對(duì)B淋巴細(xì)胞增殖能力未見(jiàn)影響；硝酸鑭對(duì)仔代大鼠的體液免疫功能未見(jiàn)影響。
　　3.孕期暴露硝酸鑭可以影響仔代