長(zhǎng)期飲用硝酸釤對(duì)小鼠免疫功能影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：研究稀土的長(zhǎng)期攝入對(duì)機(jī)體免疫功能是否存在影響，為制定稀土使用安全標(biāo)準(zhǔn)和評(píng)價(jià)稀土生物效應(yīng)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。本實(shí)驗(yàn)以不同劑量(5、50、500、2000mg/L)硝酸釤染毒3個(gè)月的ICR小鼠為對(duì)象，通過(guò)染毒過(guò)程中體重的動(dòng)態(tài)變化、臟器指數(shù)、遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)、E花結(jié)形成率、免疫球蛋白含量及腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能、紅細(xì)胞受體花環(huán)研究了小鼠細(xì)胞免疫功能、體液免疫功能、巨噬細(xì)胞吞噬功能、紅細(xì)胞免疫吸附功能的變化；另外通過(guò)對(duì)血清Sm濃度及部分與免疫功能密

2、切相關(guān)的金屬元素的濃度、血清抗氧化能力測(cè)定及紅細(xì)胞形態(tài)觀察，初步探討了可能存在的硝酸釤免疫毒性機(jī)制。研究結(jié)果如下： 1.一般體征檢查結(jié)果表明，小鼠在染毒過(guò)程中各組間體重?zé)o明顯差異(P＞0.05)。雄鼠500mg·L-1和2000mg·L-1劑量組脾指數(shù)明顯低于對(duì)照組(P＜0.05)，其它臟器指數(shù)與對(duì)照組相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，推測(cè)脾對(duì)硝酸釤作用更敏感。各劑量組免疫器官肉眼觀察與對(duì)照組無(wú)明顯區(qū)別；隨染毒劑量增高，脾組織結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，超微

3、結(jié)構(gòu)觀察發(fā)現(xiàn)淋巴細(xì)胞核形變、線粒體腫脹空化、核周間隙增寬、巨細(xì)胞增多甚至細(xì)胞解體。 2.雌鼠在50mg·L-1、500mg·L-1劑量組的足跖腫脹度明顯低于對(duì)照組(P＜0.05)；而雄鼠除5mg·L-1劑量組外，各組腫脹度均顯著下降，2000mg·L-1劑量組腫脹度僅為對(duì)照組的60％。當(dāng)硝酸釤濃度升高至2000mg·L-1時(shí)，雌雄鼠的E花結(jié)形成率均被嚴(yán)重抑制(P＜0.01)，可見(jiàn)飲用硝酸釤損傷了機(jī)體建立特異性細(xì)胞免疫的能力。

4、 3.雌鼠除5mg·L-1組外，其余各組溶血空斑形成數(shù)顯著下降(P＜0.01)，而雄鼠即使在最低劑量組PFC也出現(xiàn)明顯變化(P＜0.05)。在一定濃度范圍內(nèi)(5～500mg·L-1)，硝酸釤可能會(huì)抑制更多抗體(IgG)產(chǎn)生，隨著染毒劑量的增加，這種抑制作用減弱。硝酸釤的攝入對(duì)小鼠體液免疫應(yīng)答產(chǎn)生一定的損害作用，這種損害作用在不同性別小鼠間略有差異。 4.腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的受抑制程度隨著硝酸釤染毒劑量的增加而加重；碳廓清實(shí)

5、驗(yàn)結(jié)果顯示一定濃度的硝酸釤染毒可抑制了網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)功能的發(fā)揮。巨噬細(xì)胞吞噬功能的檢測(cè)可作為機(jī)體非特異性免疫功能損傷簡(jiǎn)便有效的監(jiān)測(cè)指標(biāo)。 5.雌雄鼠的SOD活性隨著硝酸釤濃度的增高而降低，血清中的MDA含量明顯上升(P＜0.05)，當(dāng)劑量繼續(xù)上升時(shí)，SOD活性上升，MDA含量維持在一個(gè)低水平。ICP-AES測(cè)定結(jié)果顯示：隨著硝酸釤處理濃度的升高，雌鼠血清中Sm濃度上升，而雄鼠在2000mg·L-1劑量組檢測(cè)到血清Sm濃度的明顯增加

6、，推測(cè)釤在血清中存在一定的蓄積效應(yīng)，另外雌鼠血清中與巨噬細(xì)胞殺傷力，T細(xì)胞的增殖，抗體產(chǎn)生等免疫應(yīng)答過(guò)程密切相關(guān)的Ca、Cu、Fe、Mn、Ni和Zn濃度表現(xiàn)為顯著性降低；雄鼠中僅Ca、Mn和Ni濃度受影響。硝酸釤導(dǎo)致小鼠免疫功能損傷，其機(jī)制可能與血清脂質(zhì)過(guò)氧化損傷、釤的蓄積和微量元素代謝失衡等有關(guān)。 6.抗凝作用試驗(yàn)結(jié)果顯示，5mg·L-1的硝酸釤溶液可能影響小鼠凝血機(jī)能。較低劑量染毒時(shí)E-C3bR形成率受到不同程度的抑制(P＜

7、0.05)，但E-ICR形成率變化不明顯；2000mg·L-1劑量組E-C3bR和E-ICR形成均被明顯抑制(P＜0.01)，從紅細(xì)胞形態(tài)變化上推測(cè)硝酸釤可能通過(guò)損害細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)對(duì)紅細(xì)胞免疫功能產(chǎn)生影響。 結(jié)論：1.稀土對(duì)小鼠免疫功能具有明顯的影響，表現(xiàn)為細(xì)胞免疫、體液免疫、單核-巨噬細(xì)胞及紅細(xì)胞免疫功能的抑制或損傷。2.稀土對(duì)小鼠器官水平、細(xì)胞水平和亞細(xì)胞水平都表現(xiàn)出一定的損害效應(yīng)。3.很多免疫指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果中存在雌雄鼠靈敏度差異