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文檔簡介
1、目的:
本課題通過研究實時組織彈性定量參數(shù)與免疫性肝纖維化肝組織的Ⅰ型膠原纖維(ColⅠ)、Ⅲ型膠原纖維(ColⅢ)及NLRP3(NOD-like receptor protein3)炎癥因子之間的相關性,從分子水平探討彈性成像定量參數(shù)評價肝纖維化分期及炎癥活動的可行性。
方法:
共60只Sprague-Dawley(SD)大鼠,隨機選取52只作為實驗組(免疫性肝纖維化模型),8只作為對照組。免疫性肝纖維化
2、模型造模方法:尾靜脈注射豬血清,每周2次,每次0.5ml,共14周,對照組注射等劑量生理鹽水。自造模第二周起,每兩周從實驗組與對照組分別隨機取6只和1只大鼠進行實時組織彈性成像(RTE)檢查,取得12個彈性定量參數(shù),包括肝纖維化指數(shù)(LF Index)、應變均值(MEAN)、藍色區(qū)域百分比(%AREA)、標準偏差(SD)、復雜度(COMP)、峰度(KURT)、偏度(SKEW)、對比度(CONT)、均等性(ENT)、雜亂度(IDM)、一致
3、性(ASM)及相關性(CORR)。處死大鼠,取肝右葉組織進行病理檢查及應用
western-blot技術定量檢測,取材部位盡量與彈性成像切面的感興趣區(qū)(region of interest,ROI)一致,確定肝纖維化分期(S0-S4)及炎癥分級(G0-G4),應用western-blot技術定量檢測ColⅠ、ColⅢ及NLRP3炎癥因子的表達水平,將此三種分子生物學指標與彈性定量參數(shù)進行相關性分析。
結果:
4、 1.大鼠肝組織病理檢查結果:實驗組11只大鼠因免疫刺激過重或自身免疫反應敏感而導致死亡。余41只大鼠的肝纖維化分期:7只處于 S0期,6只處于 S1期,10只處于S2期,10只處于S3期,8只處于S4期;肝組織炎癥分級:6只處于G0級,11只處于G1級,10只處于G2級,10只處于G3級,4只處于G4級。大鼠肝組織纖維化分期與炎癥分級具有顯著的相關性(r=0.844,P<0.05)。
2. ColⅠ(r=0.728,P<0.
5、05)及ColⅢ(r=0.692,P<0.05)的表達水平均與肝纖維化分期具有相關性,提示ColⅠ、ColⅢ表達水平均可反映肝組織病理纖維化程度。
3. NLRP3炎癥因子的表達水平與肝炎癥分級具有相關性(r=0.748,P<0.05),提示NLRP3炎癥因子表達水平可以反映肝組織炎癥活動壞死程度。
4. RTE彈性定量參數(shù)與ColⅠ及ColⅢ的表達水平具有相關性。在12個彈性成像參數(shù)中,LF Index、MEAN、
6、%AREA、SKEW、ENT、IDM、ASM及 CORR與ColⅠ表達水平具有相關性,其中LF Index相關性最強(r=0.694,P<0.05), MEAN次之(r=-0.643,P<0.05),差異有統(tǒng)計學意義;LF Index、MEAN、SD、ENT及ASM與ColⅢ表達水平具有相關性,其中LF Index相關性最強(r=0.614, P<0.05),MEAN次之(r=-0.556,P<0.05),差異有統(tǒng)計學意義。
7、5. RTE彈性定量參數(shù)與NLRP3炎癥因子的表達水平具有相關性。在12個彈性成像參數(shù)中,LF Index、MEAN、SD、%AREA、COMP、SKEW、ENT、IDM及ASM與NLRP3炎癥因子表達水平具有相關性,其中LF Index相關性最強(r=0.713, P<0.05),%AREA次之(r=0.672,P<0.05),差異有統(tǒng)計學意義。
結論:
RTE彈性定量參數(shù)與ColⅠ、ColⅢ及NLRP3炎癥因子表
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