RECK基因與肝纖維化發(fā)展、逆轉(zhuǎn)的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：以SD大鼠四氯化碳中毒性肝纖維化模型為研究對(duì)象，了解肝組織RECK基因、基質(zhì)金屬蛋白酶-2的活性在肝纖維化發(fā)展及逆轉(zhuǎn)過(guò)程中的動(dòng)態(tài)變化，揭示RECK基因表達(dá)與肝纖維化程度以及與基質(zhì)金屬蛋白酶-2（MMP-2）活性之間的相關(guān)性。
　　 方法：SD雄性成年大鼠（重量為140±10g）65只隨機(jī)分為A，B兩組：A組5只為肝纖維化對(duì)照組，每周2次純花生油皮下注射，劑量為3 m1·kg-1，于第8周末處死。B組60只為肝纖維化組，用C

2、Cl4皮下注射建立大鼠肝纖維化模型，每周2次用50％CCl4油溶液皮下注射，劑量為3 ml·kg-1，并于第1、2、4、6、8周末分別處死4只動(dòng)物，留取肝組織備用。B組剩余40只隨機(jī)分為C、D兩組：C組20只為肝纖維化進(jìn)展組，繼續(xù)行相同劑量的50％CCl4油溶液皮下注射，仍然是每周兩次：D組20只為肝纖維化自然逆轉(zhuǎn)組，停用CCl4，改為每周2次純花生油皮下注射，劑量為3 ml.kg-1。在實(shí)驗(yàn)8周后第2、7、14、28天兩組各處死5只動(dòng)

3、物，并留取肝組織備用。處死時(shí)測(cè)量肝重指數(shù)（即肝重/體重比值），肝組織常規(guī)HE染色檢測(cè)造模是否成功以及判斷脂肪變性的程度，天狼猩紅染色判斷肝纖維化程度，明膠酶譜法檢測(cè)肝組織MMP-2的活性，RT-PCR法檢測(cè)RECK基因mRNA表達(dá)水平，免疫組織化學(xué)染色了解肝組織RECK蛋白表達(dá)情況。
　　 結(jié)果：①在大鼠肝纖維化形成的早期和中期，肝脂肪變性逐漸加重，肝重指數(shù)逐漸升高；晚期逐漸減輕或下降；肝纖維化逆轉(zhuǎn)過(guò)程中肝脂肪變性減輕、肝重指數(shù)

4、下降更加明顯。②在肝纖維化發(fā)展過(guò)程中，肝組織RECK表達(dá)隨肝纖維化程度的加重而逐漸下降，MMP-2活性逐漸升高；逆轉(zhuǎn)過(guò)程中，RECK表達(dá)水平逐漸升高，MMP-2活性逐漸下降。③RECK表達(dá)水平和肝纖維化程度呈負(fù)相關(guān)（r=-0.56931，P<0.05），而MMP-2活性與纖維化程度呈正相關(guān)（r=0.93715，P<0.05）。④不論是在肝纖維化發(fā)展階段還是在逆轉(zhuǎn)過(guò)程中，RECK表達(dá)水平和MMP-2活性均呈負(fù)相關(guān)（形成過(guò)程中r=-0.69