乳香、黨參和當(dāng)歸提取物對雪旺細(xì)胞增殖及相關(guān)蛋白表達的影響.pdf

1、實驗通過乳香、黨參和當(dāng)歸提取物分別對雪旺細(xì)胞(Schwann Cells，SCs)的干預(yù)作用，檢測SCs的用藥安全范圍、細(xì)胞生長曲線、細(xì)胞周期時相的變化、細(xì)胞上清中腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(brain derived neurotrophic factor，BDNF)，神經(jīng)細(xì)胞黏附分子(neural celladhesion molecule，NCAM)和增殖細(xì)胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen，P

2、CNA)等指標(biāo)，探討中藥促進創(chuàng)傷愈合中神經(jīng)的修復(fù)作用。
　　 實驗以SCs為研究對象，采用MTT比色法檢測乳香提取物(ME)、黨參提取物(CPE)和當(dāng)歸提取物(AE)對SCs的細(xì)胞毒作用和增殖范圍;采用流式細(xì)胞術(shù)檢測SCs細(xì)胞周期的變化和DNA含量的百分率;ELISA試劑盒檢測SCs分泌腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)、神經(jīng)細(xì)胞黏附分子(NCAM)及增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)的變化;采用熒光定量PCR法檢測SCs中BDNF基因表達

3、量的變化。
　　 實驗結(jié)果表明:(1)乳香、黨參及當(dāng)歸提取物對SCs的安全用藥濃度分別是:62.5～8000mg/L、125～4000mg/L、125～2000mg/L。在三種中藥成分干預(yù)SCs24h和48h后，MTT比色法檢測結(jié)果顯示乳香提取物濃度為125mg/L～500mg/L時與對照組相比增殖作用差異顯著(P＜0.05);黨參提取物濃度為1000～4000mg/L時與對照組相比增殖作用差異顯著(P＜0.05);當(dāng)歸提取物濃

4、度為500～2000 mg/L時與對照組相比增殖作用差異顯著(P＜0.05)，各中藥成分干預(yù)SCs48h后對細(xì)胞增殖影響較小。(2)流式細(xì)胞儀檢查結(jié)果證實，中藥干預(yù)SCs24和48h，乳香提取物濃度為125、250和500mg/L時;黨參提取物濃度為1000、2000和4000mg/L時;當(dāng)歸提取物濃度為500、1000和2000mg/L時與對照組相比DNA含量的百分率升高顯著(P＜0.05)。(3) ELISA檢測結(jié)果顯示對SCs分泌

5、蛋白（BDNF、NCAM和PCNA）的量均有增加。(4)熒光定量PCR檢測結(jié)果顯示，乳香提取物藥物濃度為125mg/L時SCs表達BDNF基因量增加顯著;黨參提取物藥物濃度為2000mg/L時SCs表達BDNF基因量增加顯著;當(dāng)歸提取物藥物濃度為1000mg/L時SCs表達BDNF基因量增加顯著。
　　 結(jié)論:中藥提取物在適當(dāng)范圍內(nèi)促進SCs增殖，不同濃度促增殖能力不同，其中乳香、黨參和當(dāng)歸提取物濃度分別在125、2000和10