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文檔簡介
1、目的:探討腎茶提取物及熊果酸對(duì)體外原代培養(yǎng)的大鼠腎小球系膜細(xì)胞的增殖及轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)表達(dá)的影響,為腎茶的進(jìn)一步開發(fā)應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。 方法:選用150-200g(1-2月齡)雄性SD大鼠,分離腎小球,純化腎小球系膜細(xì)胞,并對(duì)其進(jìn)行鑒定。從腎茶提取物中分離得到乙酸乙酯、正丁醇2種萃取組分,均各按相當(dāng)于生藥10g·kg-1.d-1、2.5g·kg-1·d-1作為高、低劑量,熊果酸按100mg·kg-1.d-1、50mg
2、·kg-1.d-1、25mg·kg-1.d-1作為高、中、低劑量對(duì)大鼠灌胃給藥后制備含藥血清。以腎茶各組分及熊果酸的含藥血清作為干預(yù)因素,采用CCK-8、ELISA、RT-PCR方法,觀察各組含藥血清對(duì)脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的系膜細(xì)胞增殖、TGF-β1分泌及TGF-β1mRNA表達(dá)的影響。 結(jié)果:1.LPS能明顯刺激大鼠腎小球系膜細(xì)胞增殖、TGF-β1分泌及TGF-β1mRNA表達(dá)(與空白血清組比較,P<0.01)。2.不同劑量的
3、腎茶正丁醇組分與乙酸乙酯組分、熊果酸含藥血清均明顯抑制LPS刺激的大鼠腎小球系膜細(xì)胞增殖及TGF-β1分泌(與LPS對(duì)照組比較,P<0.01或P<0.05)。其中,腎茶正丁醇組分抑制作用明顯優(yōu)于乙酸乙酯組分,二者同劑量比較有顯著性差異(P<0.01)。腎茶與熊果酸各劑量組含藥血清抑制系膜細(xì)胞增殖作用未見顯著性差異(P>0.05),而腎茶各組分呈劑量依賴性地抑制系膜細(xì)胞TGF-β1分泌(高、低劑量組間比較有顯著性差異P<0.01),熊果酸
4、高劑量、中劑量組抑制TGF-β1分泌明顯比低劑量組強(qiáng)(P<0.01),但高劑量組抑制作用與中劑量組比較未見顯著性差異(P>0.05)。3.腎茶正丁醇組分高、低劑量組與乙酸乙酯組分高劑量組、熊果酸各劑量組均明顯抑制LPS刺激的大鼠腎小球系膜細(xì)胞TGF-β1mRNA表達(dá)(與LPS對(duì)照組比較,P<0.01或P<0.05),乙酸乙酯組分低劑量組與LPS對(duì)照組比較(P>0.05)。其中,腎茶正丁醇組分抑制作用明顯優(yōu)于乙酸乙酯組分,二者同劑量比較均
5、有顯著性差異(P<0.01),且高、低劑量組比較有顯著性差異(P<0.01),熊果酸高劑量組抑制作用強(qiáng)于低劑量組(P<0.05)。 結(jié)論:1.LPS能刺激大鼠腎小球系膜細(xì)胞增殖、TGF-β1分泌及TGF-β1mRNA表達(dá)。2.腎茶提取物的正丁醇、乙酸乙酯萃取組分的含藥血清均明顯抑制LPS刺激的大鼠腎小球系膜細(xì)胞增殖、TGF-β1分泌及TGF-β1mRNA表達(dá),抑制作用呈一定的劑量相關(guān)性,且正丁醇組分抑制作用明顯優(yōu)于乙酸乙酯組分。
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