低溫下血壓升高對血管平滑肌細(xì)胞BKca離子通道的影響.pdf

1、目的：
　　 觀察冷應(yīng)激條件對大鼠血壓的影響，并探討低溫條件下血管平滑肌細(xì)胞(VSMC)大電導(dǎo)鈣激活鉀通道電流(BKCa)的改變，為低溫條件下血壓升高防治提供理論依據(jù)。
　　 方法：
　　 ①動物分組及冷應(yīng)激高血壓模型的建立：選用健康成年SD大鼠30只，體重150-180克，完全隨機(jī)分為對照組和實(shí)驗(yàn)組，實(shí)驗(yàn)組又分為2、4、6、8周組，每組6只。對照組大鼠在室溫下(25±1℃)飼養(yǎng)；實(shí)驗(yàn)組大鼠每天置于(4±1)℃、

2、相對濕度為70％的氣候箱中4小時，2、4、6、8周組大鼠接受寒冷刺激時間分別為持續(xù)2、4、6、8周；
　　 ②血壓測量：于實(shí)驗(yàn)前兩周開始測量血壓，每周2次，每次測量均在在大鼠安靜狀態(tài)下讀數(shù)3次，取其平均值；
　　 ③大鼠主動脈VSMC的分離及BKca電流記錄：腹腔麻醉后將SD大鼠處死，取出胸主動脈，游離出血管中膜，剪成長2～4mm、寬2mm的條塊，分別放入酶液Ⅰ和酶液Ⅱ中，用急性酶分離法獲得單個主動脈平滑肌細(xì)胞。采用標(biāo)準(zhǔn)

3、的全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)(電壓鉗)在室溫下(20-25℃)進(jìn)行膜片鉗電流記錄，以電阻為4.0-7.0兆歐姆(MΩ)的玻璃微電極封接細(xì)胞，形成吉?dú)W高阻封接水平后以適當(dāng)程度的負(fù)壓破膜，補(bǔ)償串聯(lián)電阻和細(xì)胞膜電容(Cm)，形成全細(xì)胞記錄模式，記錄大鼠主動脈平滑肌細(xì)胞膜BKca電流。
　　 結(jié)果：
　　 1.大鼠收縮壓變化：在冷應(yīng)激環(huán)境中大鼠血壓升高。實(shí)驗(yàn)組大鼠血壓從第2周開始升高，2周冷應(yīng)激大鼠模型血壓為(102.8±2.25)mmH

4、g，對照組大鼠血壓為(89.16±3.73)mmHg，兩組相比有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p<0.05)；第4、6、8周冷應(yīng)激大鼠模型血壓分別為(114.53±4.21)mmHg：(121.94±3.03)mmHg；(135.27±5.37)mmHg，與對照組相比有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p<0.01)。
　　 2.血管平滑肌細(xì)胞膜BKca電流的變化：全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)記錄到實(shí)驗(yàn)組大鼠主動脈平滑肌細(xì)胞膜BKca電流、電流密度隨冷應(yīng)激時間延長而增大。

5、2周冷應(yīng)激大鼠模型主動脈平滑肌細(xì)胞膜BKca電流密度平均為(138.47±6.57)pA/pF，對照組大鼠主動脈平滑肌細(xì)胞膜BKca電流密度為(79.79±4.80)pA/pF，兩組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01，n=6)。4、6、8周大鼠主動脈平滑肌細(xì)胞膜BKca電流密度分別為(211.29±8.11)pA/pF；(295.27±10.77)pA/pF；(355.23±4.55)pA/pF，與對照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01，n=

6、6)。與對照組大鼠比較，第2、4、6、8周組大鼠電流分別增加(73.99±12.96)％、(165.91±23.35)％、(271.34±28.49)％、(346.35±23.55)％。
　　 3.大鼠主動脈血管平滑肌細(xì)胞膜BKca電流密度增大與冷應(yīng)激刺激時間及血壓有顯著性相關(guān)性(r=0.976，p<0.01)。
　　 結(jié)論：
　　 1.冷應(yīng)激環(huán)境的刺激可致大鼠血壓升高。
　　 2.大鼠主動脈血管平滑肌細(xì)