血紅鉚釘菇多糖的提取及緩解體力疲勞功能的研究.pdf

1、血紅鉚釘菇是一種名貴食用菌，目前，血紅鉚釘菇的研究主要集中于其栽培技術(shù)和菌絲體發(fā)酵工藝，其多糖的研究還不夠深入。隨著生活節(jié)奏加快，疲勞在生活中尤為常見，因此如何提高運(yùn)動(dòng)耐力，及時(shí)延緩或消除疲勞成為現(xiàn)在研究熱點(diǎn)之一。真菌多糖由于其具有重要的生理活性受到廣泛關(guān)注，因此，本文對(duì)血紅鉚釘菇多糖進(jìn)行了提取、純化，對(duì)其結(jié)構(gòu)做了初步分析，并對(duì)其緩解體力疲勞功能做了研究，為血紅鉚釘菇產(chǎn)品的開發(fā)提供參考。
　?。?）血紅鉚釘菇多糖提取及工藝優(yōu)化

2、r>　　采用水提醇沉方法提取血紅鉚釘菇中多糖，分別考察了液料比、提取溫度、提取時(shí)間和提取次數(shù)對(duì)血紅鉚釘菇多糖得率的影響，并應(yīng)用響應(yīng)面試驗(yàn)優(yōu)化了血紅鉚釘菇多糖提取的最佳工藝參數(shù)，最佳工藝參數(shù)為：液料比為20：1，提取溫度為90℃，提取時(shí)間為2.50h，提取次數(shù)為3次，此時(shí)多糖得率為7.73％。用Sevage法去除血紅鉚釘菇多糖中的蛋白，應(yīng)用此法去除6次后，蛋白去除率可達(dá)97.71%。
　?。?）血紅鉚釘菇多糖純化分級(jí)
　　采用

3、DEAE-纖維素離子交換柱層析和CL-6B瓊脂糖凝膠柱層析對(duì)血紅鉚釘菇粗多糖進(jìn)行分級(jí)精制。先經(jīng)DEAE-纖維素純化分級(jí)后得到4種級(jí)分，GRPA-0、GRPA-1、GRPA-2和GRPA-3，苯酚硫酸法和間羥基聯(lián)苯法分別檢測(cè)總糖和糖醛酸含量，只有GRPA-0不含糖醛酸。GRPA-1、GRPA-2和GRPA-3經(jīng)CL-6B瓊脂糖柱層析得到GRPA-2-1、GRPA-2-2、GRPA-3-1和GRPA-3-24個(gè)主要級(jí)分，總糖和糖醛酸含量檢測(cè)

4、，4種級(jí)分均含有糖醛酸。
　　（3）血紅鉚釘菇多糖四種級(jí)分的結(jié)構(gòu)分析
　　對(duì)GRPA-2-1、GRPA-2-2、GRPA-3-1和GRPA-3-2四種級(jí)分進(jìn)行紫外全波長(zhǎng)掃描，在190nm左右有最大吸收峰，符合多糖的特征吸收，在260nm和280nm處無明顯的吸收峰，說明其中不含游離核酸和蛋白成分；進(jìn)行傅里葉紅外光譜掃描，光譜圖顯示具有多糖的吸收峰，并且具有吡喃環(huán)C-H鍵的變角振動(dòng)，表明四種級(jí)分多糖為吡喃糖；高效液相色譜對(duì)各級(jí)

5、分多糖進(jìn)行單糖組成分析，GRPA-2-1和GRPA-2-2由甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和巖藻糖組成，其比例分別為4.4：2.3：1.8：53.3：28.1：10.1和5.3：1.9：3.1：51.1：30.2：2.3；GRPA-3-1和GRPA-3-2由甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖組成，其比例分別為4.3：8.2：1.2：72.1：8.6：5.6和3.4：3.5：2.1：78.2：9.9：2.9；

6、高效液相色譜測(cè)得四種級(jí)分的多糖分子量分別為：440550Da，687610Da，377650Da和1118550Da。
　　（4）血紅鉚釘菇多糖緩解體力疲勞功能的研究
　　通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究血紅鉚釘菇多糖緩解體力疲勞功能，對(duì)小鼠進(jìn)行低（100mg/kg/d）、中（250mg/kg/d）、高（625mg/kg/d）三個(gè)血紅鉚釘菇多糖劑量灌胃，測(cè)定小鼠力竭游泳時(shí)間、血乳酸、血尿素氮和肝糖原含量。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，各劑量組均可延長(zhǎng)小鼠游泳時(shí)