吸煙冠心病患者HDL對THP細胞膽固醇逆轉運的影響及機制.pdf

1、目的：通過提取正常健康人及吸煙冠心病患者的HDL培養(yǎng)THP-1細胞源性泡沫細胞，觀察吸煙冠心病患者的HDL對其膽固醇逆轉運的影響及機制，為吸煙促進動脈粥樣硬化發(fā)病機制提供理論基礎。
　　方法：采集正常健康人群及吸煙冠心病人群血樣，利用超高速離心機提取高密度脂蛋白（HDL）；利用佛波酯誘導THP-1細胞成為巨噬細胞，然后利用氧化低密度脂蛋白(ox-LDL）誘導上述細胞形成泡沫細胞，并將其分為3組，分別為：空白對照組、正常人HDL組、

2、吸煙冠心病HDL組。利用油紅O染色觀察分組泡沫細胞內脂滴情況；利用液體閃爍計數(shù)儀從表觀現(xiàn)象方面檢測各組細胞相應的膽固醇流出率；采用Western blot檢測以上3組三磷酸腺苷結合盒轉運體A1（ABCA1）、三磷酸腺苷結合轉運體G1（ABCG1）、B類Ⅰ型清道夫受體（SR-BI）相應蛋白質含量。
　　結果：⑴成功提取人HDL，并鑒定；⑵佛波酯成功誘導THP-1細胞形成泡沫細胞， ox-LDL成功誘導泡沫細胞形成；⑶和空白對照組相比

3、，正常人HDL及吸煙冠心病HDL組均可使膽固醇流出率增加（P<0.05），正常人HDL組作用較吸煙冠心病HDL組作用顯著（P<0.05）；⑷與空白對照組相比，正常人HDL組ABCA1、ABCG1蛋白表達無明顯變化，吸煙冠心病HDL組ABCA1、ABCG1蛋白表達顯著減少（P<0.05）；⑸與空白對照組相比，正常人HDL組及吸煙冠心病HDL組SR-B1蛋白表達顯著升高，正常人HDL組作用較吸煙冠心病HDL組作用顯著（P<0.05）。