吸煙和戒煙對冠心病患者高密度脂蛋白功能的影響.pdf

1、背景：
　　 吸煙是心血管疾病發(fā)展的重要危險因素之一。大量的流行病調(diào)查和臨床研究表明心血管事件的增加與吸煙相關，并且與吸煙有時間依賴和劑量依賴關系。對己存在冠心病的患者，戒煙能夠降低心肌梗死風險。煙草中含有4000多種有害物質(zhì)，其中40多種化學物質(zhì)是致癌性的，其中又有許多對心血管和呼吸系統(tǒng)有害，包括：尼古丁、焦油、亞硝胺、多環(huán)芳烴、氰化氫、醛類、一氧化碳和重金屬（包括鎘、鋁、鉛、汞等）。迄今為止，吸煙促進動脈粥樣硬化以及戒煙帶來

2、血管獲益的潛在機制仍未闡明。吸煙可以影響從血管內(nèi)皮功能紊亂到急性臨床事件發(fā)生的各個階段。戒煙能夠增加小動脈順應性，改善內(nèi)皮功能，從而改善動脈僵硬度，降低長期吸煙者的血小板聚集及血小板內(nèi)氧化還原的失衡。但是幾乎沒有研究關注吸煙和脂蛋白功能的聯(lián)系。沒有數(shù)據(jù)研究關于吸煙對高密度脂蛋白的功能和膽固醇逆轉(zhuǎn)運的影響。煙草及煙氣中可能對脂代謝產(chǎn)生影響的成分包括：尼古丁、一氧化碳和焦油等。但尚無這些成分對血脂功能影響的相關研究。
　　 研究目的

3、：
　　 1．了解冠心病患者和健康的吸煙人群吸煙及戒煙3個月對高密度脂蛋白抗氧化、抗趨化功能以及高密度脂蛋白介導的細胞內(nèi)膽固醇外流率的變化；
　　 2．探討煙草中有害成分尼古丁和一氧化碳對高密度脂蛋白產(chǎn)生的危害。研究方法：
　　 1．入選吸煙的冠心病患者和健康吸煙者，分別隨機分入吸煙組或戒煙組。吸煙組受試者繼續(xù)吸煙，戒煙組受試者戒煙3個月。分別留取3個月前后血清和血漿-80°保存?zhèn)溆谩Ａ碚心疾晃鼰熃】凳茉囌咦鳛檎?/p>

4、常對照。
　　 2．密度梯度離心法分離高密度脂蛋白，Lowry法測定其濃度，瓊脂糖凝膠電泳鑒定其純度。
　　 3．Cu2+誘導脂蛋白氧化生成共軛雙烯，234nm處檢測其紫外吸光度，了解高密度脂蛋白對低密度脂蛋白氧化易感性的保護作用。
　　 4．Transwell法測定高密度脂蛋白抑制THP-1來源的巨噬細胞趨化作用。
　　 5．熒光法測定NBD標記的膽固醇，計算高密度脂蛋白誘導的膽固醇外流率的變化。

5、>　　 6．酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測血漿基質(zhì)金屬蛋白酶．9(MMP-1)、白介素-6(IL-6)和高敏C反應蛋白(hsCRP)濃度
　　 7．熒光法測定高密度脂蛋白上對氧磷酶-1(PON-1)的活性。
　　 8．測定用尼古丁或一氧化碳共孵育過的健康人高密度脂蛋白的抗氧化性、抗趨化性和介導的膽固醇外流率（方法如上述3、4、5）。
　　 9．統(tǒng)計分析：采用SPSS17.0軟件進行統(tǒng)計分析。正態(tài)分布的計量資

6、料以均數(shù)±標準差表示，非正態(tài)分布的計量資料采用對數(shù)轉(zhuǎn)換后轉(zhuǎn)變?yōu)檎龖B(tài)分布。組間比較用one-wayANOVA，多重比較用SNK檢驗。各組隨訪3個月前后數(shù)據(jù)比較用配對t檢驗。各戒煙組與繼續(xù)吸煙組的比較采用隨訪前后數(shù)據(jù)的差值進行獨立樣本t檢驗。統(tǒng)計學差異設定為P＜0.05。
　　 結(jié)果：
　　 1．與不吸煙健康受試者相比，冠心病吸煙者的總膽紅素和HDL-c較低(P=0.018和0.037)，谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(GGT)、甘油三酯(T

7、G)和載脂蛋白B(apoB)較高（P=0.011、0.001和0.041）；健康吸煙者的谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶和載脂蛋白B較高（P=0.007和0.015）。其他生化指標在各組均無明顯差異。隨訪3個月后冠心病戒煙組受試者的載脂蛋白AI明顯升高(P=0.005)。其余指標在各組無明顯改變。
　　 2．Cu2+誘導脂蛋白氧化實驗中，不吸煙健康受試者低密度脂蛋白(LDL)基礎氧化狀態(tài)（基礎OD值）明顯低于吸煙者(P＜0.001)，冠心病吸煙者L

8、DL的基礎OD值明顯高于健康吸煙者(P＜0.001)，戒煙3個月對該指標無明顯改善（健康戒煙組P=0.158;冠心病戒煙組P=0.254）。不吸煙健康受試者的高密度脂蛋白(HDL)抗氧化能力明顯高于吸煙者（表現(xiàn)為氧化遲滯時間lagtime明顯長于吸煙者P=0.001;最大氧化速度Vmax明顯低于吸煙者P＜0.001）。冠心病吸煙者HDL的lagtime明顯短于健康吸煙者P＜0.001;Vmax明顯高于健康吸煙者P＜0.001），戒煙3個

9、月使健康吸煙者和冠心病吸煙者的lagtime均延長（健康戒煙組P=0.025;冠心病戒煙組P＜0.001），Vmax均降低（健康戒煙組P＜0.001;冠心病戒煙組P＜0.001）。不吸煙健康受試者脂蛋白最終氧化狀態(tài)(MaximumOD)低于吸煙者(P＜0.001．)。MaximumOD在冠心病吸煙者明顯高于健康吸煙者(P＜0.001)，戒煙3個月使健康吸煙者和冠心病吸煙者的最終氧化狀態(tài)均得到改善（健康戒煙組P＜0.001;冠心病戒煙組P

10、＜0.001==。
　　 3．Transwell趨化實驗中，不吸煙健康受試者的LDL對THP-1來源的巨噬細胞趨化能力明顯低于吸煙者（表現(xiàn)為較少的遷移細胞，P＜0.001）。冠心病吸煙者的LDL趨化能力明顯強于健康吸煙者(P＜0.001))，戒煙3個月對該指標的改善不明顯（健康戒煙組P=0.572;冠心病戒煙組P=0.166）。不吸煙健康受試者的HDL抑制LDL趨化的能力明顯高于吸煙者（表現(xiàn)為較少的遷移細胞，P＜0.001）。冠

11、心病吸煙者HDL抑制LDL趨化的能力明顯低于健康吸煙者(P＜0.001)，戒煙3個月后冠心病吸煙者HDL的抗趨化能力明顯提高(P＜0.001)，健康吸煙者無明顯改變(P=0.2)。
　　 4．不吸煙健康受試者的HDL誘導巨噬細胞內(nèi)膽固醇外流率明顯高于吸煙者(P=O.O01)。冠心病吸煙者HDL誘導巨噬細胞內(nèi)膽固醇外流率明顯低于健康吸煙者(P＜0.001)，戒煙3個月后健康吸煙者和冠心病吸煙者HDL誘導的膽固醇外流率均無明顯改變（

12、健康戒煙組P=0.786;冠心病戒煙組P=0.19）。
　　 5．不吸煙健康受試者血漿PON-1活性較吸煙者高(P＜0.001)，MMP-9、IL-6和hs-CRP含量較吸煙者低（所有P＜0.001）。健康吸煙者和冠心病吸煙者的血漿PON-1活性、MMP-9、hsCRP和IL-6含量均無明顯差別(P=0.494、0.710、0.359;和0.698)。戒煙3個月后健康戒煙者PON-I活性明顯升高(P＜0.001)，MMP-9含量

13、明顯降低(P＜0.001)，hsCRP含量也明顯降低(P＜0.001)。冠心病戒煙者戒煙3個月后hsCRP含量明顯降低(P=0.002)。
　　 6．CORM（一種能產(chǎn)生一氧化碳氣體的化合物）呈濃度依賴性降低HDL的抗氧化性（表現(xiàn)為lagtime縮短,5μM的CORM與對照比P=0.013;10μM的CORM與對照比P=0.002）。尼古丁呈濃度依賴性增強高密度脂蛋白的抗趨化性（表現(xiàn)為趨化細胞減少，75UM的尼古丁與對照比P=0

14、.031;100μM的尼古丁與對照比P=0.007)，兩者對HDL介導的巨噬細胞膽固醇外流率均無明顯影響。
　　 結(jié)論：
　　 1．吸煙者HDL的抗氧化性、抗趨化性和介導的膽固醇外流率明顯低于不吸煙健康受試者。
　　 2．冠心病吸煙者HDL的抗氧化性、抗趨化性和介導的膽固醇外流率均低于健康吸煙者。
　　 3．戒煙3個月可使健康戒煙者和冠心病戒煙者HDL的抗氧化性、抗趨化性得到恢復，對其介導的膽固醇外流率無