荔枝核總黃酮對活化人肝星狀細胞增殖與NF-кB、α-SMA表達影響的研究.pdf

1、目的:研究荔枝核總黃酮(total flavonoids of litchi chinensis son n,TFL)對轉(zhuǎn)化生長因子-β1（transforming growth factor-beta-1, TGF-β1）誘導(dǎo)的人肝星狀細胞（human hepatic stellate cell, HSC-LX2）增殖、凋亡與核轉(zhuǎn)錄因子-кB（nuclear factor kappa B, NF-кB）、α-平滑肌肌動蛋白（α-smo

2、oth muscle actin,α-SMA）表達的影響。
　　方法:體外培養(yǎng)HSC-LX2，TGF-β1刺激24h后給予不同濃度的TFL（80、160、320、640、800μg/ml）干預(yù)；給藥后24h、48h、72h，用MTT法分別檢測TFL對HSC-LX2增殖的影響；應(yīng)用Hoechst33258熒光染色來觀察凋亡細胞的形態(tài)學(xué)變化；采用熒光定量PCR檢測各組NF-кB、α-SMA mRNA的表達；Western blot檢測

3、各組NF-кB、α-SMA蛋白的表達情況。
　　結(jié)果：1.MTT檢測結(jié)果顯示TFL在一定程度上呈時間依賴性抑制TGF-β1誘導(dǎo)的HSC-LX2增殖，以作用48h最為明顯，其半數(shù)抑制濃度（IC50）為302μg/ml。2.TFL各劑量組作用48h后，Hoechst33258熒光染色顯示TFL各組細胞可見細胞核固縮、邊聚和裂解、凋亡小體形成等凋亡形態(tài)學(xué)變化。3.HSC-LX2細胞中NF-кB和α-SMA基因的表達水平都降低，尤以300

4、μg/ml和600μg/ml藥物濃度組較明顯，與對照組比較，有顯著性差異（P<0.05）。4.HS C-LX2細胞中NF-кB和α-SMA蛋白的表達水平呈藥物濃度依賴性降低，尤以300μg/ml和600μg/ml藥物濃度組較明顯，與對照組比較，有顯著性差異（P<0.05）。
　　結(jié)論:1.TFL對活化HSC-LX2的細胞增殖有抑制作用，同時可促進其凋亡，達到抗肝纖維化的作用，并且隨著TFL濃度和作用時間的增加，抑制作用更加明顯。2