荔枝核總黃酮對實驗大鼠肝纖維化PPARγ-cSki信號的影響.pdf

1、目的:觀察荔枝核總黃酮(total flavone from Litchi chinensis Sonn，TEL)對二甲基亞硝胺(DMN)誘導的肝纖維化大鼠的防治效果，并從PPARγ、c-Ski信號分子角度探討TFL抗纖維化的作用機制。
　　方法:將90只雄性SD大鼠隨機分為空白對照組、模型組、TFL高劑量組、TFL中劑量組、TFL低劑量組和秋水仙堿陽性對照組，每組15只。模型組、TFL高劑量組、TFL中劑量組、TFL低劑量組及秋

2、水仙堿陽性對照組大鼠用0.5％的DMN溶液（生理鹽水稀釋）按2ml/kg劑量于每周前3天連續(xù)腹腔注射，共4周，制作大鼠肝纖維化模型;造模同時TFL高劑量組以TFL200mg.kg-1.d-1灌胃給藥，TFL中劑量組以TFL100mg.kg-1.d-1灌胃給藥，TFL低劑量組以TFL50 mg.kg-1.d-1灌胃給藥，秋水仙堿組以秋水仙堿0.1 mg.kg-1.d-1灌胃給藥，空白對照組及模型組給予等體積生理鹽水灌胃，每日1次，共6周;

3、6周末處死大鼠，腹主動脈真空負壓采血檢測天冬氨酸轉氨酶(AST)，丙氨酸轉氨酶(ALT)血清水平;留取肝臟同一部位行HE，Masson染色觀察大鼠病理改變及肝纖維化程度并行肝纖維化半定量評分;采用免疫組化和Westem Blot檢測各組肝組織α-平滑肌肌動蛋白(α-smooth muscle actin，α-SMA)的表達;采用免疫組化方法和實時熒光定量PCR(Real-time Quantitative Polymerase chai

4、nReaction，qPCR)檢測過氧化物酶體增殖物活化受體γ(peroxisomeproliferators-activated receptor gamma, PPARγ)、 c-Ski(cellularsloan-kettering institute，c-Ski)的mRNA和蛋白的表達水平，對肝組織PPARγ與c-Ski進行相關性分析，并分別對PPARγ、c-Ski、α-SMA、肝纖維化程度的免疫組化結果進行相關性分析。

5、　　結果:與空白對照組比較，模型組大鼠血清AST，ALT和肝纖維半定量評分均顯著升高(P＜0.01）;肝組織α-SMA蛋白表達明顯升高(P＜0.01)，PPARγ、c-Ski mRNA和蛋白表達明顯降低(P＜0.01);與模型組比較，荔枝核總黃酮各組血清AST，ALT和肝纖維半定量評分均明顯降低(P＜0.01)，肝組織α-SMA蛋白表達明顯降低(P＜0.01)，肝組織PPARγ、c-Ski mRNA和蛋白表達的表達明顯升高(P＜0.01

6、)，且具有一定量效關系。相關分析顯示:肝組織中PPARγ與c-Ski的基因和蛋白表達均呈正相關（r=0.885，0.892，P＜0.01）;肝組織α-SMA的表達與肝纖維化程度呈正相關（r=0.808，P＜0.01）;肝組織中PPARγ、c-Ski與α-SMA的表達呈負相關（r=-0.614，-0.647，P＜0.01）;肝組織PPARγ、c-Ski的表達與肝纖維化程度呈負相關(r=-0.406，-0.484，P＜0.05)。