白藜蘆醇甙對大鼠心室肌細(xì)胞鈣通道和鉀通道的影響.pdf

1、目的：白藜蘆醇甙(polydatin)，即3，4’，5-三羥基芪-3-β-葡萄糖苷(3，4’，5-trihydroxystibene-3-β-mono-D-glucoside)，也被稱作虎杖甙，是從中藥虎杖中提取的單晶體物質(zhì)。研究表明，白藜蘆醇甙具有多種生物學(xué)活性。近年研究結(jié)果己證實(shí)polydatin對機(jī)體的多種有益效應(yīng)以及polydatin對機(jī)體多種器官均具有保護(hù)作用。對于腦，polydatin可對抗缺血和再灌注腦損傷及腦出血所致的腦

2、損傷。對于肺，polydatin對內(nèi)毒素及缺血再灌所致的肺損傷有預(yù)防和治療作用。對于腸，polydatin可以對抗腸缺血再灌注所致?lián)p傷，并改善由DSS誘導(dǎo)的小鼠大腸炎。對心臟，polydatin可對抗缺血再灌注及脂多糖介導(dǎo)的心肌損傷。此外，polydatin已被證實(shí)具有抗炎，抗休克，抗氧化的作用，并可抑制血小板聚集，減少由血管內(nèi)皮損傷所致的動(dòng)脈血栓的形成，從而改善微循環(huán)。
　　我們以往的研究表明，polydatin具有明顯的抗心肌

3、缺血再灌注損傷和抗心律失常作用。電生理學(xué)研究顯示，polydatin可以縮短正常心室乳頭肌動(dòng)作電位的復(fù)極化過程，并可降低部分去極化乳頭肌動(dòng)作電位的超射值、動(dòng)作電位幅度以及0期最大去極化速率。此作用可能是polydatin抗心律失常作用的電生理學(xué)機(jī)制之一。眾所周知，動(dòng)作電位是不同離子通過細(xì)胞膜離子通道轉(zhuǎn)運(yùn)的結(jié)果。而有關(guān)polydatin抗心律失常的離子機(jī)制至今尚未明了。本研究旨在應(yīng)用全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)，觀察polydatin對大鼠心室肌細(xì)胞

4、L-型鈣通道電流(ICa-L)，ATP敏感鉀通道電流(IKATP)，內(nèi)向整流鉀通道電流(IK1)，瞬時(shí)外向鉀通道電流(Ito)，穩(wěn)態(tài)外向鉀通道電流(Iss)的影響，從而探討polydatin抗心律失常作用的離子機(jī)制。
　　方法：實(shí)驗(yàn)采用成年雄性SD大鼠，通過離體心臟灌流及酶分離方法獲得單個(gè)的心室肌細(xì)胞。細(xì)胞置于倒置顯微鏡上標(biāo)本小浴槽中，給予恒溫和恒速細(xì)胞外液灌流，通過微操作器，使玻璃微電極和細(xì)胞接觸，并達(dá)到高阻封接，通過一定負(fù)壓，

5、形成全細(xì)胞模式。在電壓鉗方式下，通過運(yùn)行pclamp的各種記錄程序完成電流的誘發(fā)和采集。通過累計(jì)給藥法給予不同濃度的polydatin，觀察polydatin對ICa-L，Ito，IK1，Iss，和IKATP的影響。
　　結(jié)果：(1)polydatin對大鼠心室肌細(xì)胞ICa-L具有抑制作用：polydatin濃度依賴性地降低心室肌細(xì)胞ICa-L。在polydatin25μM，50μM，75μM和100μM濃度下，峰值ICa-L的降

6、低分別為17.5％、32.1％、40.5％和52.6％(P<0.01)。ICa-L的Ⅰ-Ⅴ關(guān)系曲線逐漸上移，但其電流-電壓關(guān)系無明顯變化。Polydatin對ICa-L的激活曲線及失活后的恢復(fù)過程無影響，但可使ICa-L的失活曲線向負(fù)電位方向移位(-7.4mV)。(2)polydatin對心室肌細(xì)胞內(nèi)向整流鉀通道電流(IK1)和ATP敏感鉀通道具有激活作用：在-120mV測試脈沖電壓下，與基礎(chǔ)IK1相比較，(10，50，100μM)可以

7、顯著增加峰值IK1，峰值IK1的增加可分別達(dá)35.0％、18.4％和20.8％(P<0.05)。然而，當(dāng)進(jìn)一步降低polydatin濃度(1μM)和進(jìn)一步增高polydatin濃度(>500μM)時(shí)，反而對峰值IK1無影響(P>0.05)。polydatin可增強(qiáng)DNP誘發(fā)的IKATP，在60mV和-120mV測試脈沖電壓下，50μM polydatin分別使IKATP的外向電流增加達(dá)66.2％，內(nèi)向電流增加144.6％(P<0.05)

8、。(3)polydatin對心室肌細(xì)胞瞬時(shí)外向鉀通道電流(Ito)和穩(wěn)態(tài)失活鉀通道電流(Iss)無影響。不同濃度的polydatin對Ito的峰值電流、Ⅰ-Ⅴ關(guān)系、激活曲線、失活曲線和失活后恢復(fù)均無明顯影響(P>0.05)。同樣，polydatin對Iss亦無明顯影響(P>0.05)。
　　結(jié)論：polydatin可通過加快大鼠心室肌細(xì)胞L-型Ca2+通道的失活過程而濃度依賴性地抑制L-型Ca2+通道、降低ICa-L電流；激活A(yù)T