寒、熱證候大鼠大腸癌啟動相關機制差異分析及中藥干預.pdf

1、1 I I l I l I l l l l l L I t I I I l I I I I IL I I l I I I I I IL I I l I l I I I I I |Y 3 2 3 2 1 2 9分類號 R 2 - 0 3 1 ／R 7 3 53U D G 魚! ! 密毀坌翌學校代號學 號0 5 7 2廣州中醫(yī)藥大學G u a n g z h o uU n i v e r s i t yo fC h i n e s eM e

2、 d i c i R e碩士學位論文寒、熱證候大鼠大腸癌啟動相關機制差異分析及中藥干預學位申請人指導教師姓名專 業(yè) 名 稱申請學位類型論文提交日期羅培燦文彬中西醫(yī)結合基礎科學學位2 0 1 7 年4 月摘 要目的：腫瘤微環(huán)境是腫瘤發(fā)生發(fā)展的一個重要影響因素，其中腫瘤相關成纖維細胞作為腫瘤微環(huán)境中最主要的組成細胞，參與腫瘤的發(fā)生發(fā)展、侵襲和轉移。本研究通過比較寒、熱兩種證型的大鼠大腸癌啟動時腫瘤相關成纖維細胞的差異，觀察大鼠大腸組織中腫瘤

3、相關成纖維細胞的三個代表性的標記物F A P 、f s p 一1 和P D G F R 1 3 的表達情況，以尋求不同證候大鼠大腸腫瘤發(fā)生機制可能存在的差異。方法：將大鼠隨機分為寒證模型組、熱證模型組和空白組( 雌雄各半) ，首先通過5 周的時間，建立起寒、熱證模型及空白對照模型；然后進行1 2 周的大腸癌模型制作，并從寒證模型組和熱證模型組中抽取一半大鼠，分別作為寒證中藥組和熱證中藥組，額外給與反左金丸和左金丸進行中藥反證。從第1 8

4、 周開始，每三周收集標本一次，觀察大腸癌發(fā)病情況及F A P 、f s p - 1 和P D G F R 1 3 三個指標在各組中的表達情況。結果：寒、熱證造模后大鼠出現(xiàn)較為明顯的寒、熱證的癥狀和體征，與寒熱證候相關的指標A T P 酶和S D H 酶活性也有明顯差異；在此基礎上建立的大腸癌模型，通過病理檢測發(fā)現(xiàn)大鼠大腸腫瘤發(fā)生明顯，大腸癌發(fā)生早期，病理結果以寒證模型組較為嚴重，在后期時，熱證模型組癌變率更高，而且病理分期更為嚴重。而對

5、應的中藥干預組的腫瘤出現(xiàn)時間較晚，而且腫瘤多發(fā)生于大腸以外的器官或組織。對大腸組織進行免疫組化和p c r 檢測，結果顯示F A P 、f s p 一1 和P D G F R 1 3 在兩個模型組的表達差異主要發(fā)生在腫瘤早期，隨著腫瘤進展，差異逐漸不明顯；對應的中藥干預組在腫瘤早期能夠抑制這三個標記物的表達，而隨著腫瘤進展，抑制效果越來越弱。結論：1 ．在寒、熱證的基礎上建立大腸癌模型是可行的。該模型反映出了寒、熱的差異，誘導出來的大腸