不同復(fù)溫方法下兔肢體深低溫冷凍再植后血管組織病理學(xué)變化研究.pdf

1、目的:通過實驗研究深低溫冷凍不同復(fù)溫方法下兔肢體再植后血管形態(tài)學(xué)變化，找出一種對復(fù)合組織中血管損傷最小的復(fù)溫方法，從而為深低溫處理后斷肢再植可行性提供理論依據(jù)。
　　方法：取健康新西蘭大白兔30只，隨機分為空白對照組（A組）、慢速冷凍-慢速復(fù)溫組（B組）、慢速冷凍-快速復(fù)溫組（C組）。均給予大白兔右后肢自膝上1cm處離斷。A組不進行任何處理，所有深低溫處理組均給予凍存保護劑灌注和保護。慢速冷凍慢速復(fù)溫組采用梯度化冷凍復(fù)溫處理斷肢，

2、慢速冷凍快速復(fù)溫組采用梯度化冷凍斷肢后直接放入37℃水浴快速復(fù)溫。B組、C組復(fù)溫后均行斷肢再植，再植肢體成活6小時后給予再次離斷右后下肢。A、B、C三組兔斷肢均取股血管組織采用染色光鏡及電鏡進行形態(tài)學(xué)觀察及大體觀察，光鏡病理計分結(jié)果用統(tǒng)計學(xué)分析。
　　結(jié)果：
　　（1）大體觀察：B組血管較冷凍-復(fù)溫處理前管徑略增粗，管壁結(jié)構(gòu)完整，無分層及血栓形成，通血后肢體輕度水腫，末梢血運良好；C組2例血管結(jié)構(gòu)紊亂，管腔塌陷，修剪外膜后管

3、壁結(jié)構(gòu)欠佳，未能完成再植，3例出現(xiàn)管腔分層現(xiàn)象，余血管均較冷凍-復(fù)溫處理前管徑增粗，管壁結(jié)構(gòu)尚完整，無分層及血栓形成，通血后肢體水腫明顯，末梢血運尚可。
　?。?）光鏡下形態(tài)學(xué)檢測結(jié)果：A組：內(nèi)皮細胞連續(xù)性好，排列規(guī)則有序，內(nèi)皮下層內(nèi)彈力膜結(jié)構(gòu)正常，中層平滑肌細胞核清晰，結(jié)構(gòu)正常，個別出現(xiàn)內(nèi)皮細胞點狀脫落，余結(jié)構(gòu)正常；B組：內(nèi)皮細胞存在少量脫失，部分內(nèi)皮細胞排列欠規(guī)則，偶見內(nèi)彈力膜斷裂，平滑肌細胞結(jié)構(gòu)良好，血管整體結(jié)構(gòu)良好；C組：

4、內(nèi)皮細胞片狀脫落，內(nèi)皮層與內(nèi)皮下層可見多處空隙，內(nèi)彈力膜、中層平滑肌偶見斷裂，管壁結(jié)構(gòu)欠佳。
　?。?）透射電鏡觀察內(nèi)皮細胞結(jié)果：A組：內(nèi)皮細胞結(jié)構(gòu)完好，細胞器形態(tài)良好，細胞核結(jié)構(gòu)清晰，無皺縮，細胞連接完好，與彈力內(nèi)膜附著緊密；B組：內(nèi)皮細胞結(jié)構(gòu)欠佳，細胞皺縮，細胞器結(jié)構(gòu)紊亂，少部分空泡化，細胞間連接消失，與內(nèi)彈力膜間產(chǎn)生空隙，部分脫離，甚至脫落至管腔內(nèi)；C組：內(nèi)皮細胞大量脫落，結(jié)構(gòu)欠完整，內(nèi)彈力膜連續(xù)性欠完整，線粒體腫脹，嵴消失