19％濃度DMSO灌注兔離斷后肢不同冷凍復(fù)溫方法骨骼肌微觀形態(tài)學的研究.pdf

1、目的:
　　本實驗用19％(v/v)的DMSO灌注兔離斷后肢，用4種不同冷凍復(fù)溫方法，對復(fù)合組織中的骨骼肌組織損傷程度進行對比研究，找到損傷程度最輕的冷凍復(fù)溫方法。
　　方法：
　　25只健康的新西蘭大白兔隨機分為對照組（A組）及實驗組（B、C、D、E組， B組為慢凍快復(fù)組，C組為慢凍慢復(fù)組，D組為快凍慢復(fù)組，E組為快凍快復(fù)組），實驗所用后肢均在髖關(guān)節(jié)處離斷。對照組（A組）后肢在離斷后直接用于制作標本。實驗組（B、C、

2、D、E組）先用19%濃度DMSO(二甲基亞砜)灌注，肝素鹽水洗脫。然后B組慢速冷凍—快速復(fù)溫、C組慢速冷凍—慢速復(fù)溫、D組快速冷凍--慢速復(fù)溫、E組快速冷凍—快速復(fù)溫，然后采取與對照組相同方法制作標本，病理切片用HE染色后觀察骨骼肌損傷程度。根據(jù)病理染色的結(jié)果，對骨骼肌組織的損傷程度進行統(tǒng)計學分析。
　　結(jié)果：
　　經(jīng)蘇木精-伊紅（HE）染色后的骨骼肌病理切片為：對照組(A組)：骨骼肌細胞核及細胞形態(tài)正常，骨骼肌組織未見肌纖

3、維破壞及空泡形成；實驗B組：肌細胞腫脹，可見肌纖維斷裂，組織形態(tài)尚正常；實驗C組：肌細胞水腫較輕，有少量空泡，部分肌纖維斷裂；實驗D組：肌細胞水腫嚴重，少量空泡，部分肌纖維斷裂；實驗E組：肌細胞腫脹明顯，大量空泡化，肌纖維斷裂明顯，肌纖維部分溶解。
　　結(jié)論：
　　1.在19%(v/v)二甲基亞砜灌注條件下，實驗組(B、C、D、E組)和對照組（A組）病理切片結(jié)果之間存在顯著性差異，這表明深低溫冷凍復(fù)溫對細胞有損傷；2.各個實