2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
已閱讀1頁,還剩61頁未讀, 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認領(lǐng)

文檔簡介

1、本論文研究了出發(fā)菌株地衣芽孢桿菌的生理及遺傳特性,對它所產(chǎn)的耐高溫α-淀粉酶的酶學(xué)性質(zhì)作了初步分析.提取地衣芽孢桿菌的染色體DNA,設(shè)計合適引物,運用PCR法擴增得到了耐高溫α-淀粉酶基因,并將其克隆在大腸桿菌中.運用重組PCR技術(shù)對耐高溫α-淀粉酶基因進行定點突變.主要研究以下內(nèi)容:1.地衣芽孢桿菌020401所產(chǎn)耐高溫α-淀粉酶的主要性質(zhì)為:最適pH為6.5左右,最適作用溫度為85℃,但在95℃時也能保持較高活性.2.提取地衣芽孢桿

2、菌020401的染色體DNA,設(shè)計引物,通過PCR擴增得到了1.9kb的基因片段.將其克隆在pUC19質(zhì)粒上,并轉(zhuǎn)化Escherichia coli JM109,運用藍白選擇及透明圈法篩選到了一株陽性克隆JM109/pUAM.3.通過酶活測定及蛋白電泳分析證明JM109/pUAM菌株能分泌外源基因的表達產(chǎn)物即耐高溫α-淀粉酶,目的蛋白大小約為60000左右.4.對此基因片段進行測序,并將測序結(jié)果同已發(fā)表的地衣芽孢桿菌耐高溫α-淀粉酶基因

3、序列進行比對,同源性高達99﹪以上.5.將該基因克隆在表達型載體pGEM-3Zf(+)上并轉(zhuǎn)化E.coli JM109,同樣得到了一株能產(chǎn)耐高溫α-淀粉酶的陽性克隆JM109/pGAM,SDS-PAGE電泳證明其產(chǎn)生的目的蛋白大小同JM109/pUAM菌株大小相同,酶活測定表明菌株JM109/pGAM分泌目的蛋白的能力比JM109/pUAM強.6.運用重組PCR技術(shù)對目的基因編碼第134位氨基酸殘基和第320位氨基酸殘基的密碼子分別進行

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論