血清14-3-3η蛋白水平在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎及脊柱關(guān)節(jié)病中的臨床意義.pdf

1、研究背景：
　　類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（Rheumatoid arthritis,RA）是一種慢性持續(xù)性多發(fā)性以小關(guān)節(jié)為主的自身免疫性疾病。脊柱關(guān)節(jié)?。⊿pondyloarthropathy,SpA）是以強(qiáng)直性脊柱炎（Ankylosing Spondylitis,AS）為原型,同時(shí)可累及外周關(guān)節(jié)的炎性疾病。目前RA與SpA為臨床上兩種較常見的炎性關(guān)節(jié)病，早期若不及時(shí)識(shí)別及給與干預(yù)，后期均有較高的致殘率，嚴(yán)重影響患者生活質(zhì)量。因此準(zhǔn)確的在疾病

2、早期予以正確診斷顯得尤為重要，隨著疾病診斷標(biāo)準(zhǔn)的不斷更新，近幾年影像學(xué)如磁共振成像（MRI）亦或是超聲等輔助手段在RA及SpA的診斷中已成為熱點(diǎn)，但其實(shí)驗(yàn)室診斷指標(biāo)仍維持原有現(xiàn)狀，未見有新的進(jìn)展，易造成部分實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)陰性患者的漏診，故尋求新的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)是臨床醫(yī)生目前所迫切需要的。
　　14-3-3蛋白是高度保守、幾乎在所有真核生物細(xì)胞中都表達(dá)的蛋白質(zhì)家族。主要包括7種亞型，可以與多種胞內(nèi)蛋白質(zhì)發(fā)揮相互作用，參與調(diào)節(jié)生物學(xué)過(guò)程。14

3、-3-3ε蛋白為眾多亞型中的一種，目前已有研究顯示，14-3-3ε蛋白亞型具有配體活性，可優(yōu)先激活先天免疫系統(tǒng)的細(xì)胞。其通過(guò)信號(hào)級(jí)聯(lián)形式如細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶和p38通路上調(diào)促炎細(xì)胞因子。少量研究表明14-3-3ε蛋白參與RA的發(fā)病機(jī)制，與RA的診斷、疾病活動(dòng)性及疾病預(yù)后一定相關(guān)性。并且其14-3-3蛋白自身抗體與SpA的疾病活動(dòng)性以及影像學(xué)進(jìn)展也有一定聯(lián)系。現(xiàn)經(jīng)文獻(xiàn)檢索關(guān)于14-3-3ε蛋白與RA的研究較少，且未見有14-3-3ε蛋白水

4、平與SpA的相關(guān)報(bào)道。本研究旨在通過(guò)測(cè)定RA及SpA患者血清14-3-3ε蛋白水平，進(jìn)一步明確14-3-3ε蛋白水平對(duì)于RA及SpA診斷以及疾病的預(yù)后作用，為RA及SpA患者的診斷及治療提供理論依據(jù)。
　　目的：
　　探討血清14-3-3ε蛋白水平在RA及SpA患者中的臨床意義
　　方法：
　　選擇2014年3月-2016年5月安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院風(fēng)濕科250例住院的RA患者和222例SpA患者，同時(shí)于體檢中

5、心同期選擇80例年齡、性別想匹配的正常人（對(duì)照組）。RA患者符合ACR1987年及2009年ACR關(guān)于RA的分類標(biāo)準(zhǔn)，SpA患者符合2010年ASAS分類標(biāo)準(zhǔn)。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（Enzyme Linked Immunosorbent Assay, ELISA）測(cè)定RA患者、SpA及對(duì)照組血清14-3-3ε濃度。詳細(xì)記錄RA及SpA患者各臨床及實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)，采用雙能X線骨密度儀測(cè)定RA患者（232例）股骨（股骨頸（neck）、Ward區(qū)

6、、大轉(zhuǎn)子、總股骨區(qū)）和腰椎（lumbar spine, L2、L3、L4、L2-4）部位BMD，160例SpA患者行MRI檢查并進(jìn)行SPARCC評(píng)分。
　　結(jié)果：
　　1.250例RA患者中有245例14-3-3ε血清蛋白水平高于正常，陽(yáng)性率高達(dá)98%（245/250），SpA患者中血清14-3-3ε蛋白陽(yáng)性率62%（138/222）,正常對(duì)照組陽(yáng)性率最低5%（4/80）。三組間陽(yáng)性率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（x2=261.31

7、9，P<0.0001）。RA組[2.53/(1.22-5.81)]及SpA組[0.95/(0.54-2.09)]血清14-3-3ε蛋白水平明顯高于正常對(duì)照組[0.20/(0.14-0.29)]，且RA組亦高于SpA組。三組間血清14-3-3ε蛋白水平比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（x2=248.694，P<0.0001）.并經(jīng)調(diào)整檢驗(yàn)水準(zhǔn)（P=0.05/3）后三組間兩兩比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　2.血清14-3-3ε蛋白水平在對(duì)照組[0

8、.20/(0.14-0.29)]、早期RA[3.75/(1.73-7.74)]及非早期RA[2.14/(1.19-4.23)]三組間比較有差異統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（x2=176.799，P<0.0001），并經(jīng)調(diào)整檢驗(yàn)水準(zhǔn)后三組間兩兩比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。且早期RA中14-3-3ε蛋白水平高于非早期RA。三組間陽(yáng)性率比較差異亦有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（x2=283.227，P<0.0001），但早期RA96.2%（76/79）與非早期RA98.8%（169

9、/171）兩組間陽(yáng)性率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　3.在RA患者中，血清14-3-3ε蛋白水平在類風(fēng)濕因子（rheumatoid factor, RF）陽(yáng)性與陰性分組間、抗環(huán)瓜氨酸肽（anti-cyclic citrullinated peptidesantibody,抗CCP抗體）陽(yáng)性與陰性組間、DAS28分組間、有無(wú)脊柱骨折組間、有無(wú)骨質(zhì)疏松（osteoporosis，OP）組間以及股骨頸區(qū)（neck）、war

10、d區(qū)、大轉(zhuǎn)子、L2、L3、L4有無(wú)OP組間差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），但OP組血清14-3-3η蛋白水平均高于無(wú)OP組。在neck、大轉(zhuǎn)子、L2、L3、L4正常組、骨量減少、OP三組間差異也均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。在 ward區(qū)正常組[2.14/(1.19-03.96)]、骨量減少[2.21/(1.13-5.36)]及 OP[3.39/(1.64-8.05)]三組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（x2=9.816，P=0.007），且

11、14-3-3ε蛋白水平梯度逐漸上升，OP組水平最高。
　　4.在RA患者14-3-3ε蛋白陽(yáng)性亞組中，線性相關(guān)分析顯示：血清14-3-3ε蛋白水平與VAS評(píng)分（rs=0.140, P=0.029）、HAQ評(píng)分（rs=0.136, P=0.034）呈正相關(guān)，與病程（rs=-0.149, P=0.019）、Sharp評(píng)分（rs=-0.137, P=0.047）、股骨區(qū)（neck、ward區(qū)、大轉(zhuǎn)子、總股骨區(qū)）及腰椎各BMD值（L2、L

12、3、L4、L2-4）之間呈負(fù)相關(guān)（P<0.05）。
　　5.在SpA患者中，血清14-3-3ε蛋白水平在BASDAI活動(dòng)與緩解組間，ASDAScrp活動(dòng)與緩解組間，SPARCC評(píng)分分組間、中軸及外周脊柱關(guān)節(jié)病組間和反射學(xué)陰性及陽(yáng)性組間差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　6.在SpA患者中，枕墻距、胸廓擴(kuò)張度、腰椎活動(dòng)度、指地距、VAS評(píng)分、PGA、BASFI功能評(píng)分、BASDAI1、BASDAI2、BASDAI3、BA

13、SDAI4、BASDAI5、BASDAI6、BASDAI總、ASDAScrp、SPARCC評(píng)分、ESR、CRP在血清14-3-3ε蛋白陽(yáng)性與陰性分組間差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　7.在SpA患者14-3-3ε蛋白陽(yáng)性亞組中，線性相關(guān)分析顯示：14-3-3ε蛋白與病程（rs=0.390, P<0.001）、枕墻距（rs=0.300, P=0.001）、胸廓擴(kuò)張度（rs=-0.204, P=0.021）、腰椎活動(dòng)度（rs

14、=-0.176, P=0.046）、SPARCC評(píng)分（rs=-0.354, P<0.001）、SPARCC1（rs=-0.340, P=0.001）、SPARCC2（rs=-0.235, P=0.019）、SPARCC3（rs=-0.298, P=0.003）均呈正直線相關(guān)。
　　8.222例SpA患者中有48例進(jìn)行了治療前后的對(duì)比，14-3-3ε蛋白治療后相比治療前血清水平明顯降低[0.80/(0.55-1.51)] VS[1.

15、06/(0.54-2.60)]，非參數(shù)配對(duì)比較兩組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（z=-2.413，P=0.016）。
　　9.以血清14-3-3ε蛋白為檢驗(yàn)變量，RA組（1=RA組，0=正常對(duì)照組）或SpA組（1=SpA組，0=正常對(duì)照組）分別為效應(yīng)變量。RA組ROC曲線顯示：血清14-3-3ε蛋白截點(diǎn)值為0.892ng/ml時(shí)，靈敏度為96.8%，特異度為97.5%（AUC=0.987，P<0.001）。SpA組ROC曲線顯示：血清14-

16、3-3ε蛋白截點(diǎn)值為0.447ng/ml時(shí)，靈敏度為86.9%，特異度為92.5%（AUC=0.935，P<0.001）。
　　結(jié)論：
　　1.14-3-3η蛋白在RA組及SpA組的血清水平明顯高于對(duì)照組，且其在RA及SpA組陽(yáng)性率明顯高于對(duì)照組，14-3-3η蛋白可作為正常人與炎性關(guān)節(jié)病的鑒別指標(biāo)。
　　2.14-3-3η蛋白與RA的臨床癥狀、疾病活動(dòng)性及骨質(zhì)疏松的發(fā)生密切相關(guān)。
　　3.14-3-3η蛋白水平