半滑舌鰨仔稚魚營養(yǎng)生理與開口飼料的開發(fā)研究.pdf

1、半滑舌鰨(Cynoglossus semilaevis)屬鰈形目(PleuroIlecti formes)、舌鰨科(Cynoglossidae)、舌鰨屬(Cynoglossus BLmharlan-Hamiltou)，為我國近海底層的大型名貴經濟魚類。生長速度快，肉味鮮美，深受廣大消費者的喜愛，有著廣闊的發(fā)展前景。但是在苗種生產過程中，從生物餌料轉為配合餌料期間，仍會出現(xiàn)大量的死亡，轉餌問題成為限制其擴大再生產的一個關鍵問題，微顆粒飼料

2、的研制仍是難點所在。為了促進半滑舌鰨養(yǎng)殖的產業(yè)化進程，本文開展了半滑舌鰨仔稚魚營養(yǎng)生理和開口飼料的開發(fā)研究，旨在為了解半滑舌鰨不同發(fā)育階段的營養(yǎng)需求，及其高效開口飼料的研制提供理論依據(jù)。現(xiàn)將研究結果總結如下： (1)利用形態(tài)學和連續(xù)組織切片技術，對出膜后1～30d的半滑舌鰨消化系統(tǒng)胚后發(fā)育的組織形態(tài)學進行了系統(tǒng)觀察和研究。研究表明，試驗水溫為20.0～22.O℃時，孵化后第3d，仔魚開口攝食，消化道上皮細胞出現(xiàn)分化，肝臟和胰臟開

3、始出現(xiàn)，魚體開始由內源性營養(yǎng)轉向外源性營養(yǎng)。孵化后第5d，卵黃囊完全被吸收，消化道明顯分化成口咽腔、食道、胃、前腸和后腸，仔魚消化系統(tǒng)具備了攝食和消化外源性食物的能力。此后隨著魚體的生長，粘膜層的褶皺增加，消化道上皮細胞進一步分化，腸道分段、盤旋，消化系統(tǒng)從功能和結構上逐步地完善成熟。開口攝食之后，先后發(fā)現(xiàn)在后腸出現(xiàn)嗜曙紅顆粒，在前腸出現(xiàn)空泡，表明腸上皮細胞吸收了蛋白質和脂肪。繼而糖元在肝臟中不斷地儲存。在出膜后第23天，出現(xiàn)胃腺，標志

4、著稚魚期的開始。 (2)對半滑舌鰨不同發(fā)育階段主要消化酶(酸性蛋白酶、堿性蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶)以及與消化吸收相關的堿性磷酸酶的活性變化進行了測定。結果表明，半滑舌鰨在仔魚發(fā)育早期即可檢出酸性蛋白酶和堿性蛋白酶的活力，堿性蛋白酶的2個極低值分別出現(xiàn)在仔魚開口期和仔稚魚的轉變期，酸性蛋白酶的活性從孵化后23 d左右，胃腺出現(xiàn)時開始明顯升高。早期仔魚體內表現(xiàn)出較強的淀粉酶活性，孵化后12 d其活性急劇下降，并一直保持較低的比活力狀

5、態(tài)。脂肪酶的活性在半滑舌鰨早期仔魚體內一直較低，進入稚魚期后開始緩慢上升。堿性磷酸酶活性在變態(tài)結束后出現(xiàn)大幅度的升高，這標志著腸組織結構和腸道消化功能的完善。 (3)分別在孵化后第3d(對照組)、延遲1d(D1組)、延遲2d(D2組)和延遲3d(D3組)投喂輪蟲,探討延遲投餌對半滑舌鰨仔魚生長、存活和體成分的影響。實驗水溫21～22℃,鹽度為31.00,試驗周期為15d。結果顯示,仔魚于孵出后第3d進入混合營養(yǎng)期,從第4d開始加

6、速生長,第5d進入外源性營養(yǎng)期。延遲投餌2d,會使仔魚的干重、粗蛋白和粗脂肪的含量明顯的低于對照組(p<0.05)。隨著投餌天數(shù)的延遲,仔魚的存活率隨之降低。在仔魚開口后4d內,各組死亡率差異不大;開口后第6d(孵化后第8d),仔魚死亡率呈現(xiàn)明顯差異。在孵化后第10d,延遲投餌3d的仔魚接近完全死亡。仔魚的饑餓試驗分為饑餓和正常投喂兩個處理組,每組500尾(各設2個平行),分別在孵化后一直不投餌,和在孵化后第3d開始投喂輪蟲。試驗結果表

7、明:仔魚的混合營養(yǎng)期持續(xù)2d;孵化后第8d開始,饑餓仔魚的全長和干重明顯地低于攝食仔魚(p<0.05)。饑餓仔魚在孵化后第11d全部死亡,攝食仔魚的成活率為35[％]。攝食仔魚的攝食率在孵化后10d達到100[％],饑餓仔魚的攝食率在孵化后4d達到最大值為63.44[％],在孵化后6d降為36.89[％],因此,半滑舌鰨仔魚初次攝食期耐受饑餓的時間臨界點即PNR發(fā)生在孵化后第6～7d。 (4)測定了半滑舌鰨(Cynoglossu

8、s semitaevis)早期發(fā)育階段的生化組成、氨基酸和脂肪酸組成的變化。在不同發(fā)育階段,蛋白質和脂肪含量都沒有顯著性差異,但是灰分含量從受精卵到卵黃囊仔魚有明顯地降低。從受精卵發(fā)育到卵黃囊仔魚,氮的含量保持不變,而氫和碳的含量則顯著下降。碳/氮的比例在早期發(fā)育階段呈下降趨勢?？偘被峤M成在受精卵和卵黃囊仔魚之間變化明顯,但是在卵黃囊仔魚和開口仔魚之間只有細微的變化。開口仔魚的總必需氨基酸組成與攝食的輪蟲的總必需氨基酸組成之間有很高的

9、相關性,這表明開口仔魚的餌料的氨基酸組成平衡。半滑舌鰨受精卵的游離氨基酸含量很高,為139 mgg<'-1>。干重,占總氨基酸含量的22.3[％]。但是卵黃囊仔魚的游離氨基酸含量急劇下降,僅為3.6mg g<'-1>,發(fā)育到開口仔魚含量沒有進一步變化,為2.5mg g<'-1>。這些變化說明游離氨基酸在半滑舌鰨發(fā)育早期參與了重要的代謝活動。飽和脂肪酸的總量從受精卵到卵黃囊仔魚明顯下降,但是發(fā)育到開口仔魚含量無顯著變化。單不飽和脂肪酸和多

10、不飽和脂肪酸的總量在不同發(fā)育階段無顯著變化,而EPA和DHA的含量從卵黃囊仔魚到開口仔魚有明顯下降。這表明在早期發(fā)育階段半滑舌鰨主要利用飽和脂肪酸作為能量代謝的基質，對飽和脂肪酸的利用程度大于單不飽和脂肪酸和多不飽和脂肪酸。半滑舌鰨似乎需要長鏈的多不飽和脂肪酸如EPA和DHA，因為沒有發(fā)現(xiàn)可以從它們的前體進行生物合成來獲得。在發(fā)育過程中ARA的含量保持不變，有可能表明半滑舌鰨對ARA也有需求。 (5)以孵化后20d的半滑舌鰨仔魚

11、為研究對象，采用4種不同的動物蛋白源制成等氮等能的4組微顆粒飼料，分別為：(1)魚粉組(FM組)；(2)蝦粉組(SM組)；(3)貽貝粉組(MM組)；(4)魚蛋白水解物組(FPH組)，進行21d的飼養(yǎng)試驗，探討飼料中不同蛋白源對半滑舌鰨仔魚生長和存活的影響。試驗共進行2ld，水溫保持在21±1℃，每隔7d取樣一次，測定魚體的干重。實驗結果表明，各組的成活率沒有顯著性差異。試驗結束時，F(xiàn)PH組仔魚的體重明顯地高于MM組(p<0.05)，但是

12、與FM組和SM組之間則沒有明顯的差異。FPH組仔魚在生長和存活率方面都有良好的表現(xiàn)，但是除了體重之外，其它指標與其它組相比沒有顯著性差異。試驗結束時除了MM組的粗蛋白含量明顯低于其它組之外，各組試驗魚的粗蛋白和粗脂肪含量都沒有明顯的差異。本研究結果認為魚蛋白水解物和魚粉是半滑舌鰨仔魚適宜的蛋白源，可以保證其生長和成活。 (6)用活餌料(鹵蟲)、添加不同劑量消化酶的微顆粒飼料來投喂孵化后20d的半滑舌鰨仔魚，飼育25天后添加消化酶

13、組的仔稚魚體重明顯高于未添加組(p<0.05)，但是低于活餌料組(p<0.05)，活餌料組的成活率明顯高于微顆粒飼料組(p<0.05)。除堿性磷酸酶以外，不同餌料對仔稚魚的蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶的活性都沒有影響。 (7)探討了活餌料和配合飼料聯(lián)合投喂對半滑舌鰨轉餌的影響。半滑舌鰨仔魚的養(yǎng)殖水溫為21±1℃，從孵化后第6d開始試驗，采用4種投喂方案，分別是：A為投喂鹵蟲，投喂量為10 individuals mL<'-1>；B為投

14、喂鹵蟲，投喂量為5individuals mL<'-1>；C為混合餌料，投喂鹵蟲10 individuals mL<'-1>和配合飼料1 2 mgL<'-1>；D為混合餌料，投喂鹵蟲5 individualsmL<'-1>q和配合飼料12 mgL<'-1>在試驗開始的第一周，各組還同時投喂輪蟲。結果顯示，將配合飼料和活餌料(輪蟲和鹵蟲)混合投喂，可以使仔魚完成變態(tài)，特定生長率分別為18.5±1．4％和18.7±1.6％，成活率分別為40

15、±7.6％和48.5±6.8％，達到與單獨投喂活餌料相似的結果(特定生長率分別為18.3±1.2％和19.3±1.9％，成活率分別為41.2±11.3％和38±4.9％)。 然而，在孵化后第31d開始轉餌，直至完全投喂配合飼料，各實驗組的生長和存活率之間存在顯著的差異。在孵化后第60d斷餌試驗結束時，在仔魚階段進行聯(lián)合投喂的兩組魚的成活率相近，C組為62.1±7.6％，D組為62.8±3.9％，顯著高于單獨投喂活餌料的A組(49