7,8-二羥黃酮對AD小鼠學習記憶和神經(jīng)病理學的影響.pdf

1、目的：
　　最近報道TrkB的激動劑，7,8-二羥黃酮(7,8-dihydroxyflavone，DHF)可以通過提高軸突、肌肉再生和神經(jīng)遞質(zhì)的傳遞而對神經(jīng)興奮性毒性、中風和帕金森病的動物模型有保護作用。DHF對AD的神經(jīng)病理學的影響目前還不清楚。本研究通過體內(nèi)和體外實驗證實DHF是否對β淀粉樣蛋白前體（amyloidβ precursor protein，APP）的切割加工和認知功能有影響。
　　方法：
　　將6周齡

2、APP23/PS45轉基因小鼠隨機分為對照組（Con組）和7,8-二羥黃酮（DHF組）。DHF組給予DHF5mg/Kg腹腔注射，Con組腹腔注射等容量的17％DMSO的PBS溶液，連續(xù)4周。最后一次藥物干預24小時后行Morris水迷宮實驗，測定小鼠空間學習與記憶能力。水迷宮實驗結束后斷頭取腦，然后用Western blotting檢測腦內(nèi)Aβ淀粉樣蛋白前體（APP），β分泌酶（BACE1），β-C末端片段（β-CTF） C99/C89

3、和PS1蛋白的表達水平，ELISA檢測腦組織中Aβ40/Aβ42水平，再次使用RT-PCR檢測APP/BACE1/PS1的基因mRNA水平的變化。用免疫組化檢測AD小鼠腦內(nèi)老年斑數(shù)量。體外實驗使用AD的細胞模型20E2和2EB2以及SH-SY5Y細胞系，使用不同濃度的DHF（0,0.25,0.50,1,5,and10mΜ）處理24小時后，再用Western blotting檢測20E2,2EB2和SH-SY5Y細胞內(nèi)Aβ淀粉樣蛋白前體（

4、APP），β-C末端片段（β-CTF）C99/C89蛋白的表達水平，并檢測2EB2的BACE1水平。
　　結果：
　　與Con組比較，DHF組小鼠隱蔽平臺逃避潛伏期和活動總路徑無統(tǒng)計學差異，穿越平臺次數(shù)無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；DHF組小鼠腦組織內(nèi)APP,BACE1,β-CTF和PS1蛋白表達未見明顯改變（P＞0.05）同時mRNA,Aβ40/Aβ42水平和老年斑數(shù)量均未見明顯減少（P＞0.05）。體外實驗表明DHF組和

5、Con組相比，APP，BACE1，和CTF水平無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。
　　結論：
　　我們發(fā)現(xiàn)DHF對APP，淀粉蛋白前?位分解酶1(BACE1)，淀粉蛋白（Aβ）沒有作用。在細胞實驗DHF對APP的切割沒有影響。DHF沒有減少APP23/PS45轉基因AD小鼠模型腦內(nèi)的老年斑的產(chǎn)生。同時DHF早期治療沒有改善AD小鼠的學習與記憶損傷。我們的研究表明DHF作為一種新藥早期用于減少Aβ的病理學改變和改善認知缺損仍然需要