沉默ACTN1基因表達(dá)能抑制腎癌細(xì)胞的生長(zhǎng)且誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡.pdf

1、目的：探討ACTN1基因（α-actin1）表達(dá)與腎細(xì)胞癌發(fā)病的相關(guān)性。在其它類型腫瘤（結(jié)腸癌、乳腺癌、胰腺癌、卵巢癌等）中已經(jīng)證實(shí) ACTN基因在癌組織中是高表達(dá)的，但是ACTN1基因與腎癌的關(guān)系尚不清楚。若能證明ACTN1基因在腎細(xì)胞癌中同樣高表達(dá)，在體外功能實(shí)驗(yàn)中觀察沉默ACTN1基因的表達(dá)之后，否能影響腎癌細(xì)胞的生長(zhǎng)及凋亡。
　　方法：收集38例腎癌患者的腎癌組織及相對(duì)應(yīng)的癌旁組織通過實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈反應(yīng)（qRT-PCR）

2、和免疫印跡（western-blotting，WB）的方法來觀察ACTN1基因在癌組織中的表達(dá)情況。設(shè)計(jì)針對(duì)ACTN1基因的siRNA來沉默該基因在腎癌細(xì)胞系786-O和A704中的表達(dá)，通過與空白對(duì)照組和陰性對(duì)照組之間的對(duì)比觀察ACTN1基因?qū)δI癌細(xì)胞系的生長(zhǎng)、增殖、侵襲、遷徙、凋亡、以及細(xì)胞周期等方面的影響。通過測(cè)序的方法探索影響腎癌組織中ACTN1基因高表達(dá)的影響因素。
　　結(jié)果：⑴在38例腎癌患者的腎癌組織中ACTN1的表

3、達(dá)比相對(duì)應(yīng)的癌旁組織要高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。⑵siRNA能有效地、特異地下調(diào)腎癌細(xì)胞系786-O和A704中ACTN1基因mRNA（P＜0.01）和蛋白的表達(dá)。⑶ACTN1基因表達(dá)的下調(diào)會(huì)抑制腎癌細(xì)胞系786-O和A704增殖、侵襲、遷移。⑷ACTN1基因表達(dá)的下調(diào)會(huì)誘導(dǎo)腎癌細(xì)胞系786-O和A704的凋亡。⑸ACTN1基因表達(dá)的下調(diào)會(huì)影響腎癌細(xì)胞系786-O和 A704細(xì)胞周期，使細(xì)胞周期停滯在 G0/G1期。⑹腎癌

4、中 ACTN1基因的高表達(dá)可能與基因拷貝數(shù)變異（copy number alterations，CNAs）有關(guān)。
　　結(jié)論：①ACTN1基因在腎細(xì)胞癌中的高表達(dá)提示該基因在腎細(xì)胞癌發(fā)生發(fā)展的過程中起到重要的作用，是腎癌形成的相關(guān)癌基因之一；②下調(diào)ACTN1基因的表達(dá)可抑制腎癌細(xì)胞系的增殖、侵襲、遷移，說明ACTN1基因可能在腎細(xì)胞癌中對(duì)腫瘤的生長(zhǎng)、向周圍組織侵犯、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的方面起著至關(guān)重要的作用。③下調(diào)ACTN1基因的表達(dá)會(huì)有到腎