丙戊酸誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)樣細(xì)胞分化中對(duì)Oct-4的影響.pdf

1、骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow mesenchymalstem cells，BMSCs)是一種來源于骨髓的具有多向分化潛能的成體干細(xì)胞，它具有的特點(diǎn)包括：多向分化和自我更新的特性，骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在一定的條件和刺激因子作用下，可以分化為神經(jīng)元樣細(xì)胞、成骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、心肌細(xì)胞等。但是有關(guān)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)樣細(xì)胞分化的調(diào)控機(jī)制的研究尚未取得突破性進(jìn)展。有關(guān)研究實(shí)驗(yàn)表明，丙戊酸作為組蛋白去乙?；敢种苿?，其能夠抑制

2、腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)和干細(xì)胞分化，本研究實(shí)驗(yàn)應(yīng)用組蛋白去乙?；敢种苿┍焖嶙鳛檎T導(dǎo)劑，探索大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)樣細(xì)胞分化的過程中對(duì)Oct-4的影響。
　　目的:
　　探討丙戊酸誘導(dǎo)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向成神經(jīng)樣細(xì)胞分化過程中對(duì)OCT-4的影響。
　　方法:
　　體外分離SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞，將其分為兩組：對(duì)照組，不加丙戊酸，細(xì)胞加入預(yù)誘導(dǎo)液（含1μmol/Lβ-ME，10％FBS的DMEM/F12）培養(yǎng)24小

3、時(shí)，然后換誘導(dǎo)液（含200μmol/L BHA,2%DMSO的DMEM/F12）誘導(dǎo)5小時(shí)。實(shí)驗(yàn)組，誘導(dǎo)前12小時(shí)，在細(xì)胞培養(yǎng)液中加入丙戊酸。用倒置相差顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)，免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測(cè) NSE、GFAP、Oct-4蛋白的表達(dá)。Western blot檢測(cè)細(xì)胞內(nèi) NSE及 GFAP蛋白OCT4的表達(dá)。
　　結(jié)果:
　　倒置顯微鏡下可以觀察到骨髓間質(zhì)干細(xì)胞呈紡錘狀、橢圓形，誘導(dǎo)后出現(xiàn)突出，向周圍伸出明顯突起，呈現(xiàn)神經(jīng)細(xì)胞樣