刺蒺藜、染料木素對(duì)大鼠卵巢發(fā)育的影響.pdf

1、目的：⑴研究刺蒺藜對(duì)大鼠卵泡發(fā)育及卵母細(xì)胞凋亡的影響及其相關(guān)調(diào)控機(jī)制。⑵探討染料木素對(duì)中年、早期老年大鼠卵泡發(fā)育的影響。
　　 方法：①用刺蒺藜對(duì)出生后1-4天（d）大鼠腹腔注射（20mg/(kg.d)），分別取出生后2d，4d齡新生鼠卵巢，對(duì)受孕11.5天大鼠進(jìn)行灌胃（40mg/(kg.d)）直至生產(chǎn)，分別取出生后1d，2d，4d 齡新生鼠卵巢，所取卵巢經(jīng)固定、脫水、包埋后切片，應(yīng)用蘇木精-伊紅(hematoxylin-eos

2、in，HE)染色觀察刺蒺藜對(duì)大鼠卵泡發(fā)育的影響，用末端脫氧核苷?；D(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的dUTP 缺口末端標(biāo)記法(TUNEL)觀察刺蒺藜對(duì)大鼠早期卵泡凋亡的影響。用免疫組化方法觀察FOXO3、MnSOD2、Bim、p27和Bcl-xl 在卵巢組織中的表達(dá)情況。并用刺蒺藜對(duì)3和10月齡大鼠進(jìn)行灌胃（40mg/(kg.d)），連續(xù)用藥4 周后處死，取雙側(cè)卵巢，用HE 染色觀察不同發(fā)育階段卵泡比例，同時(shí)對(duì)9-10 月齡大鼠行陰道涂片，觀察其動(dòng)情周期變化

3、，連續(xù)6 周。②用染料木素對(duì)4和10月齡大鼠進(jìn)行灌胃（160mg/(kg.d)），連續(xù)用藥4周后處死，分別取染料木素灌胃組和對(duì)照組大鼠雙側(cè)卵巢, 用蘇木素-伊紅(HE)染色觀察不同發(fā)育階段卵泡比例，同時(shí)對(duì)9-10月齡大鼠行陰道涂片，觀察其動(dòng)情周期變化，連續(xù)6周。
　　 結(jié)果：⑴結(jié)果顯示1，2，4d齡的大鼠卵巢中，刺蒺藜處理組中的裸露卵母細(xì)胞比例都低于對(duì)照組；在1，2d齡的大鼠卵巢中，刺蒺藜處理組的原始卵泡比例都增高，但初級(jí)卵泡變

4、化不明顯。在4d 齡的大鼠卵巢中原始卵泡的比例降低而初級(jí)卵泡和次級(jí)卵泡的比例升高。刺蒺藜處理的各年齡組的新生鼠卵巢中，TUNEL 陽(yáng)性的卵母細(xì)胞的比例都低于相應(yīng)的對(duì)照組，F(xiàn)OXO3a、p27和Bim陽(yáng)性的卵母細(xì)胞的比例低于相應(yīng)的對(duì)照組，而MnSOD2和Bcl-xl陽(yáng)性的卵母細(xì)胞比例都高于相應(yīng)的對(duì)照組。3月齡大鼠刺蒺藜灌胃組與對(duì)照組相比原始卵泡和閉鎖卵泡的比率減少了，但竇狀卵泡和黃體卻增多了。10月齡大鼠刺蒺藜灌胃組中閉鎖卵泡和原始卵泡的

5、比例高于對(duì)照組，竇狀卵泡的比例減少。且絕大多數(shù)刺蒺藜灌胃組中的大鼠維持正常的動(dòng)情周期（4-6d），對(duì)照組大鼠的動(dòng)情周期逐漸轉(zhuǎn)變成不規(guī)則或延長(zhǎng)（4-12d）。⑵在染料木素灌胃組4 月齡大鼠卵巢內(nèi)原始卵泡、次級(jí)卵泡的比例升高，竇狀卵泡、閉鎖卵泡的比例下降；在染料木素灌胃組的10 月齡大鼠卵巢內(nèi)原始卵泡、次級(jí)卵泡的比例升高，閉鎖卵泡的比例下降，且灌胃組的10 月齡大鼠維持著規(guī)則的動(dòng)情周期。
　　 結(jié)論：①刺蒺藜可以加速大鼠卵母細(xì)胞巢破