辣椒素受體中介染料木黃酮缺血后處理對再灌注大鼠胃黏膜的保護作用.pdf

1、目的:探討染料木黃酮genistein 缺血后處理對再灌注大鼠胃黏膜的保護作用的機制及辣椒素受體在其保護機制中的作用。
　　 方法：本實驗采用健康Sprague-Dawley 大鼠采用夾閉大鼠腹腔動脈30 min松開動脈夾血流復(fù)灌1 h的胃缺血-再灌注(GI-R) 模型在此損傷模型基礎(chǔ)上于再灌注前5 min 靜脈注射低劑量的染料木黃酮(Geni)作為缺血后處理觀察其對大鼠GI-R 后胃黏膜損傷指數(shù)和細胞增殖凋亡相關(guān)因子的表達變化

2、于缺血前靜脈給予辣椒素受體特異阻斷劑Capsaizepine, CPZ或CGRP 受體阻斷劑CGRP8-37 或每天一次連續(xù)四次皮下給予大量辣椒素記錄各組胃黏膜損傷指數(shù)并檢測胃黏膜丙二醛(MDA) 含量超氧化物歧化酶(SOD)的活性變化并采用RT-PCR 和Western blot 方法檢測CGRP 在背根神經(jīng)節(jié)及胃黏膜的表達水平變化于缺血后處理前給予PKC 拮抗劑Chelerythrine 與PI3K 拮抗劑LY294002 以初步探

3、討染料木黃酮缺血后處理保護效應(yīng)的分子機制。
　　 結(jié)果：
　　 1.低劑量的染料木黃酮缺血后處理對再灌注胃黏膜有明顯的保護效應(yīng)尤其以500ìg/kg 的劑量最為顯著其胃黏膜損傷指數(shù)及細胞凋亡率顯著降低。
　　 2.缺血前給予辣椒素受體特異阻斷劑或皮下給予大量辣椒素均可阻斷染料木黃酮缺血后處理的保護效應(yīng)。
　　 3.缺血前給予CGRP 拮抗劑CGRP8-37可阻斷染料木黃酮缺血后處理的保護效應(yīng)RT-PCR

4、和Western blots 結(jié)果亦表明CGRP 在染料木黃酮缺血后處理組的胃黏膜與背根神經(jīng)節(jié)內(nèi)表達增加而沒有在辣椒素受體特異阻斷劑capsazepine 和大量的辣椒素組。
　　 4.PKC 拮抗劑與PI3K拮抗劑可拮抗染料木黃酮缺血后處理的保護作用Western blots 結(jié)果發(fā)現(xiàn)染料木黃酮缺血后處理組的p-Akt 表達量顯著高于其他組表明PKC-PI3K-Akt 信號通路在后處理保護效應(yīng)中起重要作用。
　　 5.

5、與單純?nèi)毖?再灌注組相比染料木黃酮后處理后胃黏膜MDA 含量顯著降低,而SOD 活性明顯升高具有抗氧化作用。
　　 結(jié)論：結(jié)果表明染料木黃酮缺血后處理對再灌注胃黏膜有顯著的保護效應(yīng)辣椒素受體中介了其保護效應(yīng)并進一步促進了對辣椒素敏感的感覺神經(jīng)元及部分胃黏膜細胞合成釋放內(nèi)源性CGRP 增加通過PKC-PI3K-Akt 信號通路發(fā)揮了抗胃黏膜再灌注損傷的保護作用另外染料木黃酮缺血后處理具有抗氧化作用可減少再灌注后氧自由基的產(chǎn)生抑制胃