溫度敏感性離子通道TRPV3在人類膝關節(jié)軟骨及滑膜組織中的表達.pdf

1、目的：
　　檢測溫度敏感性離子通道TRPV3（thermosensitive ion channnel TRPV3）在人的膝關節(jié)滑膜及軟骨標本中的分布，對人滑膜及軟骨組織中TRPV3所起的作用進行研究。
　　方法：
　　集取各種年齡人正常的膝關節(jié)滑膜及軟骨分別10例和5例，膝骨關節(jié)炎軟骨及滑膜組織各5例，每例軟骨組織均取自脛骨平臺，滑膜組織標本均取自關節(jié)囊內(nèi)層，分裝在-70℃冰箱中。番紅“O”染色證實軟骨標本有無退行性

2、變。首先分出5例OA軟骨標本為OA組，取5例60-69歲為正常對照組，運用Western blot、RT-PCR檢測正常和OA軟骨、滑膜中TRPV3有無表達分布及趨勢，再用免疫熒光和免疫組化方法測得TRPV3在正常及OA軟骨中分布表達以及趨勢。然后Western blot檢測正常軟骨標本，所得條帶測灰度值，分30-39歲組和60-69歲組各5例，最后采取Western blot檢測TRPV3位于兩組軟骨中的趨勢。
　　結果：

3、>　　番紅“O”染色OA軟骨標本顯微鏡觀察異常，色度及分層模糊，細胞之間著色較低。正常軟骨標本染色均勻，淺層到深層染色由淺至深，顯示無退行性改變；RT-PCR、Western blot、免疫熒光與免疫組化方法在軟骨及滑膜組織中都有TRPV3表達，免疫熒光檢測TRPV3在軟骨細胞膜上有表達，且OA較正常軟骨表達較強；考馬斯亮藍染色控制上樣量，檢測TRPV3條帶灰度值分析，結果顯示TRPV3的表達量OA組高于正常對照組，t檢驗有統(tǒng)計意義（P