原發(fā)性帕金森病結(jié)腸粘膜下神經(jīng)叢α-突觸核蛋白陽(yáng)性包涵體檢測(cè).pdf

1、背景：
　　帕金森?。≒arkinson’sdisease,PD）是一種神經(jīng)退行性疾病，常見(jiàn)于中老年人，也是最常見(jiàn)的突觸核蛋白病之一，目前被認(rèn)為是包括運(yùn)動(dòng)癥狀和非運(yùn)動(dòng)癥狀的多系統(tǒng)疾病。典型的運(yùn)動(dòng)癥狀包括靜止性震顫、運(yùn)動(dòng)遲緩、肌強(qiáng)直及姿勢(shì)步態(tài)障礙，又被稱(chēng)為“運(yùn)動(dòng)四主征”。非運(yùn)動(dòng)癥狀包括嗅覺(jué)障礙、自主神經(jīng)功能障礙、睡眠障礙、認(rèn)知功能障礙，又成為帕金森病的“非運(yùn)動(dòng)四主征”。這些多樣的臨床特征反映了PD患者在患病過(guò)程中神經(jīng)化學(xué)和神經(jīng)解剖學(xué)

2、的廣泛變化，不僅有黑質(zhì)紋狀體多巴胺的參與，含去甲腎上腺素能和5-羥色胺能腦干系統(tǒng)、膽堿能額葉及腦干區(qū)域等也參與其中。α-突觸核蛋白（α-synuclein，路易小體的重要成分）分布與非運(yùn)動(dòng)癥狀密切相關(guān)。除了中樞神經(jīng)系統(tǒng)，自主神經(jīng)系統(tǒng)、外周神經(jīng)系統(tǒng)也受累及，交感神經(jīng)系統(tǒng)、副交感神經(jīng)系統(tǒng)、唾液腺等器官也受累及。在非運(yùn)動(dòng)癥狀中，自主神經(jīng)功能障礙主要以胃腸道的表現(xiàn)為主，且PD病人的胃腸道功能逐漸受到關(guān)注。大約30％的PD患者患有胃腸道功能障礙，

3、便秘是PD胃腸道功能障礙最被認(rèn)可的癥狀之一。相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道，PD患者發(fā)生便秘的幾率接近90%，且隨著疾病的逐步發(fā)展，發(fā)病率也逐步上升。非運(yùn)動(dòng)癥狀（non-motorsymptoms,NMS）在帕金森病患者發(fā)病的各個(gè)時(shí)期里均可出現(xiàn)，也可以在運(yùn)動(dòng)癥狀之前出現(xiàn)。非運(yùn)動(dòng)癥狀嚴(yán)重危害了PD患者的社會(huì)功能和生活質(zhì)量，影響程度甚至超過(guò)了運(yùn)動(dòng)癥狀，對(duì)PD非運(yùn)動(dòng)癥狀的進(jìn)行早期識(shí)別、及時(shí)治療，從而能夠及時(shí)診斷和改善帕金森病患者的生活質(zhì)量顯得非常重要。

4、　　截止目前為止，PD的診斷主要依賴(lài)臨床表現(xiàn)，神經(jīng)病理學(xué)確診只能用于尸檢的研究。根據(jù)大量的研究表明，α-synuclein廣泛分布于帕金森病人體內(nèi)。不僅局限于中樞神經(jīng)系統(tǒng)，路易小體（Lewybodies,LB）在唾液腺、下頜下腺、腎上腺髓質(zhì)、皮膚、心神經(jīng)叢、盆腔神經(jīng)叢、交感神經(jīng)、及腸神經(jīng)系統(tǒng)(entericnervoussystem,ENS)等也有發(fā)現(xiàn)。PD病早期可以出現(xiàn)各種不同的胃腸道癥狀，尤其是便秘、排便功能障礙、流涎、吞咽困難等，

5、因此我們進(jìn)一步推測(cè)α-突觸核蛋白陽(yáng)性包涵體于PD早期在腸神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)形成，因此在早期通過(guò)對(duì)結(jié)腸粘膜進(jìn)行活檢來(lái)進(jìn)一步確診PD的研究，這些研究極有可能在健在病人體內(nèi)發(fā)現(xiàn)突觸核蛋白相關(guān)的組織病理，從而有效的提高PD診斷的準(zhǔn)確性。
　　目的：
　　運(yùn)用結(jié)腸鏡對(duì)PD病人結(jié)腸粘膜進(jìn)行活檢，檢測(cè)PD患者結(jié)腸粘膜下神經(jīng)叢α-突觸核蛋白陽(yáng)性包涵體形成，探討結(jié)腸粘膜下α-突觸核蛋白陽(yáng)性包涵體的存在是否有可能做為帕金森病早期診斷的生物學(xué)指標(biāo)。

6、>　　方法：
　　1.本研究收集PD患者（病程＜6個(gè)月）8例為PD1組，收集PD患者（病程≥6個(gè)月）10例為PD2組，以及正常對(duì)照組12例為NC組。收集PD患者的臨床資料，按照納入及排除標(biāo)準(zhǔn)，并且對(duì)PD患者進(jìn)行UPDRSⅢ、Hoehn＆Yahr分級(jí)量表評(píng)分。運(yùn)用結(jié)腸鏡活檢術(shù)收集PD患者的結(jié)腸粘膜標(biāo)本。
　　2.采用免疫組化法和蛋白印跡法（westernblot）檢測(cè)結(jié)腸粘膜下神經(jīng)叢α-突觸核蛋白陽(yáng)性包涵體的表達(dá)。
　　

7、3.應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件分析，所得實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s)來(lái)表示。應(yīng)用單因素方差分析、Bonferroni法或秩和檢驗(yàn)，以p＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　1.經(jīng)免疫組化法檢測(cè)，8例PD1組患者中有6例于結(jié)腸粘膜下神經(jīng)叢內(nèi)發(fā)現(xiàn)α-突觸核蛋白陽(yáng)性包涵體，10例PD2患者中有10例于結(jié)腸粘膜下檢測(cè)到α-突觸核蛋白陽(yáng)性包涵體。健康對(duì)照組（NC組）內(nèi)未發(fā)現(xiàn)α-突觸核蛋白陽(yáng)性包涵體。
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