Clec9a親和肽的篩選及其靶向DC的免疫活性研究.pdf

1、AdissertationsubmittedtoZhengzhouUniversityforthedegreeofdoctorThqscreeningandimmunoactivitiesofpeptidesescreenimmunoactivitiesOIDeDtidestargetingClec9aondendriticcellByZhongyiYanSupervisor：ProfYuanmingQiProfYanfengGaoSu

2、bject：PathogenicBiology(CancerImmunology)SchoolofBasicMedicalSciencesSeptember2016摘要Clee9a親和肽的篩選及其靶向DC的免疫活性研究博士研究生閆中義導(dǎo)師祁元明教授高艷鋒教授鄭州大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院中國(guó)鄭州450001目的：樹(shù)突狀細(xì)胞(dendriticcell，DC)是一類最重要的參與T淋巴細(xì)胞應(yīng)答的抗原遞呈細(xì)胞，介導(dǎo)自身免疫耐受和調(diào)節(jié)適應(yīng)性免疫應(yīng)答。基于D

3、C的腫瘤疫苗能夠有效激活抗腫瘤的CD8T細(xì)胞反應(yīng)，是一種越來(lái)越有效的免疫治療工具。研究發(fā)現(xiàn)的Clec9a分子特異性表達(dá)在小鼠的CD8aDC和CDl03DC以及與其功能相當(dāng)?shù)娜说腂DCA3DC上。這些類群的DC被認(rèn)為具有很強(qiáng)的交叉遞呈能力和刺激初始T細(xì)胞(naiveT)增殖能力。因此CD8&DC親和肽有助于抗原靶向、刺激nafveT細(xì)胞增殖和引發(fā)CTL反應(yīng)，而Clec9a對(duì)于CD8aDC交叉遞呈起著關(guān)鍵的作用。Clec9a是選擇性表達(dá)的內(nèi)

4、吞性受體，所以抗原靶向到Clec9a分子具有提高DC交叉遞呈外源性或內(nèi)源性抗原的能力，同時(shí)能增強(qiáng)T細(xì)胞抗腫瘤免疫應(yīng)答。Clec9a通過(guò)其C型凝集素結(jié)構(gòu)域(CTLD)與配體分子細(xì)胞骨架蛋白F—actin相互作用，引起免疫反應(yīng)。因此我們以mClec9a—CTLD為靶點(diǎn)，利用噬菌體展示肽庫(kù)技術(shù)篩選到靶向mClec9a的親和肽。利用FLDC或過(guò)表達(dá)mClec9a細(xì)胞(HEK293TmCl礎(chǔ)8)以及計(jì)算機(jī)對(duì)接模型對(duì)靶向肽的親和性和結(jié)合特征進(jìn)行了研