動脈內(nèi)膜樹突狀細(xì)胞變化在尿毒癥加速性動脈粥樣硬化小鼠中作用.pdf

1、與普通人群相比，尿毒癥患者動脈粥樣硬化導(dǎo)致的心血管事件的發(fā)病率與死亡率顯著升高，成為尿毒癥患者的首位死因。尿毒癥加速性動脈粥樣硬化病變形成的時(shí)間更短，病變更重，其機(jī)制尚不完全清楚。目前已有多項(xiàng)研究證實(shí)樹突狀細(xì)胞(Dendriticcell，DC)在普通動脈粥樣硬化、系統(tǒng)性紅斑狼瘡加速性動脈粥樣硬化、肺炎衣原體加速性動脈粥樣硬化等疾病的病理生理改變中起到關(guān)鍵作用，那么其是否也參與了尿毒癥加速性動脈粥樣硬化？尚未見相關(guān)研究，本文就此進(jìn)行了初

2、步探討。
　　目的:研究動脈內(nèi)膜DC變化在尿毒癥加速性動脈粥樣硬化小鼠中作用。
　　方法:分別取30只6周齡雄性ApoE-/-C57小鼠，按隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分為3組:羅格列酮治療組、尿毒癥組、動脈硬化組，每組10只，飼以高脂飲食;另取10只6周齡雄性野生型C57小鼠，飼以普通飲食，為對照組。所有小鼠飼養(yǎng)普通飼料2周后開始建模，ApoE-/-小鼠每天飼以高脂飲食(配方:普通飼料79.8％，豬油20％，膽固醇0.2％)，促進(jìn)動脈

3、斑塊形成;C57小鼠飼以普通飲食。治療組及尿毒癥組行腎臟大部分損毀術(shù)，即8周齡時(shí)行背部右后外側(cè)2cm切口進(jìn)行皮質(zhì)電灼術(shù)，2周后，行左側(cè)腎臟切除，對照組及動脈硬化組行假手術(shù)。術(shù)后6周，治療組予以羅格列酮20 mg/(kg·d)灌胃治療，其余兩組予以等量生理鹽水灌胃，共治療5周后干預(yù)治療結(jié)束。檢測BUN、TC、TG等生化指標(biāo)，觀察造模是否成功;Western blot檢測主動脈內(nèi)成熟DC數(shù)量;流式細(xì)胞技術(shù)檢測脾臟中成熟DC數(shù)量;Elisa檢

4、測外周血IL-12p70水平。
　　結(jié)果:尿毒癥組與動脈硬化組比較，BUN顯著升高，動脈內(nèi)膜斑塊面積分?jǐn)?shù)增大(P＜0.05)，動脈內(nèi)膜中成熟DC表達(dá)增多(P＜0.05)，說明尿毒癥組加速了動脈粥樣硬化病程，造模成功。尿毒癥組較動脈硬化組中成熟DC增多，同時(shí)伴隨有更為嚴(yán)重的粥樣硬化斑塊形成(P＜0.05)，目前大量研究已證實(shí)DC在普通動脈粥樣硬化中的重要作用，在疾病進(jìn)展過程中，其從外周淋巴組織遷移至動脈管壁，加重動脈病變，我們考慮在

5、合并有尿毒癥導(dǎo)致的免疫紊亂中，更多的DC遷移入動脈內(nèi)膜中，增生活化，加重動脈病變;脾臟中成熟DC表達(dá)減少[CD11c:(3.06±0.07)％ vs(5.04±0.13)％，CD83:(6.96±0.06)％ vs(11.48±0.14)％，P＜0.05]， IL-12p70分泌減少[(57.11±3.11 vs116.00±8.72)ng/L，P＜0.05]，說明在尿毒癥情況下，外周淋巴器官中DC的數(shù)量及活性均降低，這與眾所周知的尿毒

6、癥相關(guān)性免疫缺陷狀態(tài)相一致;而在動脈硬化的條件下，外周DC則處于數(shù)量增多，明顯活化的狀態(tài)，與目前公認(rèn)的動脈粥樣硬化存在免疫激活相一致。PPARγ(Peroxisome proliferator activated receptorγ，過氧化物酶體增殖物激活受體γ)是一種表達(dá)于DC上的重要功能受體，其在動脈粥樣硬化中的作用，目前受到廣泛關(guān)注。在動脈粥樣硬化中，激活該受體，可通過多種途徑抑制DC最終起到抗AS的作用。因此我們設(shè)立PPARγ激

7、動劑羅格列酮治療組以便抑制DC的成熟和活化，觀察DC的功能狀態(tài)對尿毒癥加速性動脈粥樣硬化的影響。我們發(fā)現(xiàn)，羅格列酮治療組與尿毒癥組比較，動脈內(nèi)膜斑塊面積分?jǐn)?shù)減少(P＜0.05)，動脈內(nèi)膜中成熟DC數(shù)量減少(P＜0.05)，脾臟中成熟DC數(shù)量減少[CD11c:(1.22±0.02)％ vs(3.06±0.07)％，CD83:(3.12±0.10)％ vs(6.96±0.06)％， P＜0.05]，IL-12p70分泌減少[(34.25±1

8、1.27 vs57.11±3.11)ng/L，P＜0.05]，但血脂水平并無明顯差異;這就說明PPARγ激動劑羅格列酮改善尿毒癥加速性動脈粥樣硬化的作用與其抑制DC相關(guān)，而血脂水平可能在尿毒癥加速性動脈粥樣硬化中并不是主要的加速原因。羅格列酮治療組的動脈內(nèi)膜中成熟DC減少，說明在尿毒癥加速性動脈粥樣硬化小鼠中，動脈內(nèi)膜增生程度與內(nèi)膜中成熟DC數(shù)量成正相關(guān)，進(jìn)一步說明了DC在局部的功能狀態(tài)在尿毒癥加速性動脈粥樣硬化中的重要作用。羅格列酮治