尿毒癥毒素對(duì)甲酚硫酸鹽對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展影響的研究.pdf

1、目的：
　　慢性腎病患者心血管疾病的發(fā)病率及其進(jìn)展速度都遠(yuǎn)高于普通人群。與進(jìn)展為終末期腎病相比，更多的輕中度慢性腎病患者死于心血管并發(fā)癥。而這一現(xiàn)象又無(wú)法用傳統(tǒng)危險(xiǎn)因素在慢性腎病患者中高發(fā)這一原因來(lái)充分解釋。因此，應(yīng)有慢性腎病患者特有的心血管危險(xiǎn)因素的存在。目前學(xué)者們將研究焦點(diǎn)轉(zhuǎn)向了對(duì)甲酚硫酸鹽這一蛋白結(jié)合型尿毒癥毒素上。并且已有大量臨床試驗(yàn)表明不同程度的慢性腎病患者體內(nèi)對(duì)甲酚硫酸鹽的升高均和心血管疾病相關(guān)。而且也有部分基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)結(jié)

2、果表明對(duì)甲酚硫酸鹽可損傷血管內(nèi)皮。因此，我們推測(cè)對(duì)甲酚硫酸鹽可能與動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展有關(guān)。因此，本文擬通過(guò)臨床、細(xì)胞及動(dòng)物三個(gè)方面對(duì)這一假說(shuō)進(jìn)行驗(yàn)證。
　　方法：
　　1.在腎臟科血液透析門診入選符合標(biāo)準(zhǔn)的200名血液透析患者。通過(guò)病史詢問(wèn)和病例資料查詢，詳細(xì)記錄患者的基線資料。利用高效液相色譜分析(HPLC)的方法檢測(cè)每位患者體內(nèi)血清對(duì)甲酚硫酸鹽的水平，并行頸動(dòng)脈超聲檢查，根據(jù)超聲結(jié)果將該200名患者分為頸動(dòng)脈粥樣斑塊組

3、（101名）和無(wú)頸動(dòng)脈斑塊組(99)名。分析對(duì)甲酚硫酸鹽水平與頸動(dòng)脈斑塊的有無(wú)及面積大小的相關(guān)性。之后對(duì)上述患者進(jìn)行為期5年的隨訪，最終有160人完成隨訪。5年后觀察每位患者頸動(dòng)脈斑塊的進(jìn)展情況，并分析其與血清對(duì)甲酚硫酸鹽水平的相關(guān)性。
　　2.根據(jù)參考文獻(xiàn)化學(xué)合成對(duì)甲酚硫酸鹽。通過(guò)購(gòu)買或者原代分離獲取人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞，人主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞，人單核巨噬細(xì)胞和小鼠腹腔巨噬細(xì)胞。檢測(cè)對(duì)甲酚硫酸鹽對(duì)上述內(nèi)皮細(xì)胞和巨噬細(xì)胞炎癥水平及單核-內(nèi)皮

4、粘附的影響并檢測(cè)NADPH氧化酶及ROS的產(chǎn)生在其中的作用。
　　3.利用灌胃的方法給予處于慢性腎病狀態(tài)的APOE-/-小鼠對(duì)甲酚硫酸鹽干預(yù)，觀察其對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生的影響，并觀察NADPH氧化酶抑制劑夾竹桃素是否會(huì)抑制對(duì)甲酚硫酸鹽的這一作用。
　　結(jié)果：
　　1.多元Logistic回歸顯示，在行血液透析的患者中，血清對(duì)甲酚硫酸鹽水平的升高是頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。并且血清對(duì)甲酚硫酸鹽的水平與患者頸動(dòng)脈

5、粥樣斑塊的面積呈正相關(guān)。且隨訪5年后該相關(guān)性依然存在。并且對(duì)甲酚硫酸鹽水平和頸動(dòng)脈斑塊的進(jìn)展正相關(guān)，多元線性回歸分析表明對(duì)甲酚硫酸鹽水平的升高是頸動(dòng)脈粥樣斑塊進(jìn)展的獨(dú)立預(yù)測(cè)因子。
　　2.無(wú)論在蛋白水平還是mRNA水平，對(duì)甲酚硫酸鹽均可刺激內(nèi)皮細(xì)胞和巨噬細(xì)胞內(nèi)炎癥因子和細(xì)胞粘附因子的高表達(dá)，促進(jìn)單核細(xì)胞向血管內(nèi)皮的粘附，并且增加上述細(xì)胞內(nèi)ROS的產(chǎn)生。而對(duì)甲酚硫酸鹽的上述生物學(xué)效應(yīng)均可被NADPH氧化酶抑制劑所抑制。
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6、.對(duì)甲酚硫酸鹽促進(jìn)APOE-/-小鼠主動(dòng)脈粥樣斑塊的發(fā)生，促進(jìn)其血管組織中炎癥水平的升高及ROS產(chǎn)生增加。而上述表現(xiàn)在一定程度上可被NADPH氧化酶抑制劑夾竹桃素所抑制。
　　結(jié)論：
　　1.血液透析患者血清中對(duì)甲酚硫酸鹽水平與其頸動(dòng)脈粥樣斑塊的發(fā)生發(fā)展有關(guān)。
　　2.對(duì)甲酚硫酸鹽可刺激內(nèi)皮細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的炎癥因子的表達(dá)，進(jìn)而促進(jìn)了動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生，而這一現(xiàn)象可能與其通過(guò)促進(jìn)NADPH氧化酶的高表達(dá)進(jìn)而使ROS產(chǎn)生增