白介素-28B基因多態(tài)性與乙型肝炎、肝硬化、肝癌遺傳易感性的研究.pdf

1、目的：
　　白介素-28B又稱IFN-λ3，屬于Ⅲ型干擾素，是一種在抗肝炎病毒感染、肝細胞增殖和癌變過程中起關(guān)鍵作用的細胞因子。慢性乙型肝炎、肝硬化、肝癌的發(fā)生發(fā)展過程不僅受病毒感染和環(huán)境等因素的影響，也與免疫遺傳因素有密切關(guān)系。而在我國，肝炎、肝硬化、肝癌這三種疾病相互關(guān)聯(lián)、相互影響，往往同時存在。雖然目前已有關(guān)于白介素-28B基因多態(tài)性與肝臟疾病的研究，但缺乏對慢性乙型肝炎、肝硬化、肝癌的系統(tǒng)性的研究。本研究通過檢測白介素-2

2、8B基因rs12979860和rs8099917兩個研究位點的基因多態(tài)性，得到其在廣西人群中的分布特點，獲得有意義的位點和基因型，探討白介素-28B基因多態(tài)性與乙型肝炎、肝硬化、肝癌遺傳易感性之間的關(guān)系，為廣西乙型肝炎、肝硬化、肝癌的預(yù)防和個體化治療提供新的遺傳指標和思路。
　　方法：
　　1.研究對象:以2013年10月至2014年9月廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院體檢中心的體檢者和首次入院的住院病人為研究對象，總共610例。對

3、照組為隨機健康體檢者，共納入164例。病例組為慢性乙型肝炎（CHB）患者154例、肝硬化(LC)患者108例和原發(fā)性肝癌(HCC)患者184例，共納入446例。
　　2.基因多態(tài)性分析方法:采集研究對象的抗凝全血，以酚-氯仿法提取全血DNA，采用聚合酶鏈反應(yīng)-限制性片段長度多態(tài)性法（PCR-RFLP）對白介素-28B基因rs12979860和rs8099917兩個研究位點進行基因分型，同時進行DNA直接測序驗證。
　　3.數(shù)

4、據(jù)分析:兩個研究位點在各組中基因型和等位基因頻率通過直接計數(shù)法獲得，并檢驗是否符合哈-溫遺傳平衡定律，用以判斷納入各研究組的研究對象是否具有可比性和群體代表性。用x2檢驗比較各組中研究位點的基因型和等位基因分布頻率的差異，檢驗水準為雙側(cè)α=0.05。以上均用SPSS16.0軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析。
　　結(jié)果：
　　1.rs12979860和rs8099917兩個位點各組各基因型實際頻率與預(yù)計頻率相比，結(jié)果無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.0

5、5)，符合哈-溫遺傳平衡定律，各研究組納入的研究對象具有良好的群體代表性和可比性。
　　2.在本地區(qū)人群中，rs12979860位點存在基因多態(tài)性，共檢測到CC、CT、TT三種基因型，以突變基因型CC為主，占79.00％以上，TT最少，占2.79％。rs8099917位點存在基因多態(tài)性，共檢測到TT、TG、GG三種基因型，以野生基因型TT為主，占86.00％以上，GG最少，占0.49％。
　　3.基因型和等位基因的分布情況:

6、(1) rs12979860位點CC、CT、TT三種基因型和C、T等位基因在各組中的分布有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05)，其中肝癌組與對照組相比較，基因型和等位基因的分布有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.0167);(2) rs8099917位點TT、TG、GG三種基因型和T、G等位基因在各組中的分布無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05），并且三組病例組分別與對照組相比較，基因型和等位基因的分布均無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)。
　　4.性別分布:(1)在男

7、性人群中，rs12979860位點CC、CT、TT三種基因型在肝癌組中的分布有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05)，C、T等位基因在各組中的分布有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05)，其中肝癌組與對照組相比較，等位基因的分布有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.0167);(2)在男性人群中，rs8099917位點TT、TG、GG三種基因型和T、G等位基因在肝硬化組中的分布有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05);(3)在女性人群中，rs12979860、 rs8099917兩位點各

8、基因型和等位基因在病例組和對照組中的分布均無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)。
　　5.年齡分布:(1)在年齡＜40歲人群中，rs12979860位點CC、CT、TT三種基因型和C、T等位基因在慢性乙型肝炎組中的分布有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05)。在年齡為40～60歲人群中，rs12979860位點CC、CT、TT三種基因型和C、T等位基因在肝癌組中的分布有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05);(2)rs8099917位點TT、TG、GG三種基因型

9、和T、G等位基因在各年齡層的各組別中的分布均無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)。
　　6.民族分布:(1)在漢族和壯族人群中，rs12979860位點CC、CT、TT三種基因型和C、T等位基因在肝癌組中的分布有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05);(2)在壯族人群中，rs8099917位點TT、TG、GG三種基因型在肝硬化組中的分布有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05)。
　　結(jié)論：
　　1.在廣西地區(qū)，白介素-28B基因的rs12979860

10、位點基因型以突變純合子CC為主，rs8099917位點基因型以野生純合子TT為主。
　　2.白介素-28B基因rs12979860位點基因多態(tài)性與乙型肝炎、肝硬化、肝癌的遺傳易感性相關(guān)，攜帶等位基因T可能是導(dǎo)致廣西人群慢性乙型肝炎、肝硬化、肝癌發(fā)生發(fā)展的因素之一，尤其體現(xiàn)在男性人群和60歲以下人群中。
　　3.白介素-28B基因rs8099917位點多態(tài)性與慢性乙型肝炎、肝硬化、肝癌的遺傳易感性無相關(guān)性。但也可能受本研究樣本