ERS標(biāo)志物PDI表達(dá)對肝癌細(xì)胞遷移的影響.pdf

1、目的：探討內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激（ERS）前后肝癌細(xì)胞中蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶(PDI)的表達(dá)水平及PDI過表達(dá)對肝癌細(xì)胞遷移能力的影響。
　　方法：取培養(yǎng)的第3代人正常肝細(xì)胞株LO-2、肝癌細(xì)胞株HepG2和高轉(zhuǎn)移能力肝癌細(xì)胞株SMMC-7721，采用150 mmol/L無水乙醇處理48 h誘導(dǎo)發(fā)生ERS；采用Western blot方法檢測無水乙醇處理前后葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78（GRP78）、生長停滯及DNA損傷誘導(dǎo)基因153（ CHOP）、X-

2、盒-結(jié)合蛋白-1（ XBP-1）及PDI的表達(dá)水平；用特異性LV-PDIA2(9923-1)病毒轉(zhuǎn)染3種細(xì)胞，觀察PDI過表達(dá)對肝癌細(xì)胞遷移能力的影響。
　　結(jié)果：無水乙醇處理48h，在HepG2及LO2細(xì)胞中GRP78表達(dá)上調(diào)，而SMMC-7721細(xì)胞中GRP78表達(dá)下調(diào)，分別與無水乙醇處理前比較，P<0.05,有統(tǒng)計學(xué)意義。在無水乙醇處理48h，LO2及SMMC-7721細(xì)胞中CHOP表達(dá)上調(diào),分別與無水乙醇處理前比較，P<0

3、.05，有統(tǒng)計學(xué)意義；而在無水乙醇處理前后，HepG2細(xì)胞中均無CHOP表達(dá)。在無水乙醇處理48h，3種細(xì)胞中XBP-1均上調(diào)，LO2細(xì)胞與無水乙醇處理前比較，P>0.05，無統(tǒng)計學(xué)意義；HepG2及SMMC-7721細(xì)胞中XBP-1與無水乙醇處理前比較，P<0.05，有統(tǒng)計學(xué)意義。無水乙醇處理前，細(xì)胞中PDI的表達(dá)水平從高到低為SMMC-7721細(xì)胞、LO2細(xì)胞、HepG2細(xì)胞，3種細(xì)胞比較P<0.001；無水乙醇處理48h，3種細(xì)胞

4、的PDI表達(dá)水平均下調(diào)，分別與無水乙醇處理前比較，P<0.05，有統(tǒng)計學(xué)意義。轉(zhuǎn)染LV-PDIA2(9923-1)病毒前， HepG2細(xì)胞遷移能力最弱，其次為LO2細(xì)胞，遷移能力最強的為SMMC-7721細(xì)胞；轉(zhuǎn)染LV-PDIA2(9923-1)病毒使PDI過表達(dá)后，HepG2細(xì)胞遷移能力最弱，其次為LO2細(xì)胞，遷移能力最強的為SMMC-7721細(xì)胞，3種細(xì)胞比較P<0.05，有統(tǒng)計學(xué)意義；與病毒轉(zhuǎn)染前比較，LO2細(xì)胞的遷移能力降低（P