大黃素對(duì)肝癌細(xì)胞AIF和EndoG蛋白表達(dá)的影響.pdf

1、背景與目的：原發(fā)性肝癌是臨床常見的惡性腫瘤，具有起病隱匿、進(jìn)展迅速、高度惡性、易轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)、治療難度大、生存期短等特點(diǎn)，其總體的相對(duì)5年生存率較低，且有低齡化趨勢(shì)，嚴(yán)重威脅人類生命健康。祖國(guó)醫(yī)學(xué)認(rèn)為肝癌屬于“積聚”、“癥瘕”、“黃疸”等范疇，經(jīng)過長(zhǎng)期的臨床實(shí)踐和探索，在防治肝癌復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移以及改善中晚期肝癌患者的癥狀、提高生存質(zhì)量、延長(zhǎng)生存期等方面具有優(yōu)勢(shì)。在以往治療肝癌的效方中，大黃是出現(xiàn)頻率最高的單味中藥，其有效性已得到普遍的認(rèn)可和重視

2、?，F(xiàn)代基礎(chǔ)研究發(fā)現(xiàn)，大黃素是大黃的重要有效單體，可通過多種機(jī)制發(fā)揮抗腫瘤作用，其中誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡是其重要的抗腫瘤作用機(jī)制之一。凋亡機(jī)制研究發(fā)現(xiàn)，在抑制了介導(dǎo)細(xì)胞凋亡的主要分子半胱天冬氨酸蛋白酶（Caspase）之后，細(xì)胞凋亡仍然可以發(fā)生。而線粒體膜間蛋白凋亡誘導(dǎo)因子（AIF）和核酸內(nèi)切酶G（Endo G）可以直接介導(dǎo)核內(nèi)凋亡發(fā)生，是非Caspase依賴的凋亡通路的重要標(biāo)志。既往研究發(fā)現(xiàn)大黃素可通過Caspase依賴途徑誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡

3、，但是否還可以通過誘導(dǎo)線粒體膜間蛋白凋亡誘導(dǎo)因子及核酸內(nèi)切酶G表達(dá)、釋放及核轉(zhuǎn)位，直接降解DNA，引起肝癌細(xì)胞非Caspase依賴的凋亡尚未見報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)擬通過觀察大黃素干預(yù)后肝癌細(xì)胞AIF和EndoG蛋白表達(dá)的變化，初步探討大黃素對(duì)肝癌細(xì)胞非Caspase依賴凋亡通路的影響。 方法：將體外培養(yǎng)的CBRH-7919及HepG2兩種肝癌細(xì)胞各分為四組，分別為空白對(duì)照組、Caspase抑制劑組、大黃素干預(yù)組、大黃素+Caspase抑

4、制劑組；取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，藥物作用48小時(shí)后提取各組細(xì)胞胞漿及胞核蛋白；采用Western blot法分別檢測(cè)各組細(xì)胞胞漿和胞核內(nèi)AIF與EndoG的表達(dá)，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果：AIF和EndoG在大黃素干預(yù)組、大黃素+Caspase抑制劑組細(xì)胞胞漿和胞核的表達(dá)均高于空白對(duì)照組及Caspase抑制劑組，其中以大黃素+ Caspase抑制劑組的表達(dá)最高。 結(jié)論：大黃素能促進(jìn)體外培養(yǎng)的大鼠肝癌CBRH-7919細(xì)