利用染色體加倍技術(shù)創(chuàng)建甘藍(lán)型油菜非整倍體.pdf_第1頁(yè)
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1、南京農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文利用染色體加倍技術(shù)創(chuàng)建甘藍(lán)型油菜非整倍體姓名:楊桂娟申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):細(xì)胞生物學(xué)指導(dǎo)教師:楊清;管榮展20080601C R E A T I o N O F R A P E S E E D A N E U P L O I D S B Y C H R O M O S O M ED O U B L I N G T E C H N I Q U EA B S T R A C TC h r o m o s o m e

2、 - d o u b l e d ( C D ) s e e d l i n g s ( 2 n = 4 x = 7 6 ) w e r eo b t a i n e df r o mh o m o z y g o u sr a p e s e e d ( B r a s s i c a n a p u s L .) l i n eN J 2 3 0 b y c o l c h i c i n et r e a t m e n t .T

3、 h eC D p l a n t sh a v eb e e ns u c c e s s i v e l ys e l f - c r o s s e df o rt h r e eg e n e r a t i o n sa n d c h r o m o s o m e n u m b e ra n dt r a i t s i nt h es e l f - c r o s s e dp r o g e n i e s w e

4、 r eo b s e r v e d .T h e r e s u l t s a r e s h o w n a sf o l l o w s :1 ) A d o u b l i n gp e r c e n t a g eo f 5 3 .5 7 %w a so b t a i n e dw h e n g e r m i n a t e dr a p e s e e d sw e r et r e a t e d w i t

5、h lO m g /Lc o l c h i c i n e .P l a n t l e t s w e r e r e g e n e r a t e d o nt h e s o l i dM Sm e d i u mw i t h o u ta n yg r o w t hs u b s t a n c e .R o o t sw e r ef o r m e do n1 /2 M S + 0 .1 m g /LI B A +

6、0 .1 m g /LN A A .2 ) T h eC Dp l a n t s ( D 1 g e n e r a t i o n ) w e r ed w a r f e d , m e a s u r e do n l y7 0 —8 0 c mh e i g h t ;w i t h o u t m a i nb r a n c ha f t e r b o l t i n ga n d s h o w e dg o o dg

7、 r o w t hv i g o u r .T h el e a v e so f t h eC Dp l a n t sW e r eb i g g e ra n d t h i c k e r , w h i l et h e l e a f t y p ew a s s i m i l a r t or a p e s e e d .T h e b l o s s o mo fC D p l a n t sw a sa b o

8、u tt e nd a y se a r l i e rt h a np a r e n t s .E v e np o l l e nv i a b i l i t yW a s l o w , s e e d sc o u l d b e p r o d u c e d b y s e l f - i n b r e d i n g .T h es e e dc o l o u r W a S b l a c ka n d s a

9、m e w i t h p a r e n t .3 ) V a r i a t i o n s i ns e l f - c r o s s e dg e n e r a t i o no f D 10 3 2 g e n e r a t i o n ) W e r e r i c hi na g r o n o m i ct r a i t sa n d f e r t i l i t yp r o p e r t y , e t

10、c .A n d m a n y m u t a n t p l a n t ss u c h a sm a l es t e r i l e ,l a r g es i l i q u e ,l a r g e s p i k e ,a n dl e a fc o l o re f i o l a t i n g p r o p e r t i e sW e r ed i s c o v e r e d .I tw a s a l s

11、 of o u n dt h a ts e p a r a t i o n o c c u r r e d w i t h t h e c h a r a c t e r o f s e e d c o l o u r , w h i c h p r e s e n t e d h e r e d i t a r yc o n s i s t e n c y f e a t u r eb e t w e e n u p p e r a

12、n d s u b s e q u e n t g e n e r a t i o n :s o m ep l a n t sh a v e b l a c k - s e e d ,s o m e h a v e y e l l o w - s e e d a n d o t h e r sh a v e m i x e d s e e do f y e l l o w - s e e d a n d b l a c k —s e e

13、 d .4 ) T h e c h r o m o s o m e n u m b e r o f t h es e l f - c r o s s e dg e n e r a t i o n D 3a n d D 4 p l a n t st e n d e d t ob e2 n 一< 3 8 ,a n dm o s t o f p l a n t c h r o m o s o m e n u m b e r s W e

14、r e2 n = 3 0 ,3 2 ,3 4 , 3 6 ,3 8 .I ts h o w s t h a tt h e c h r o m o s o m e i ns e l f - c r o s s e dp r o g e n i e s l o s ta n d s u b d u c t e d b e e a u s i n g o f a d a p t a b i l i t ya n da b n o r m a

15、lh e r e d i t a r y .5 ) B yc h r o m o s o m e n u m b e r c o u n t i n g ,a y e l l o w - s e e d e d a n e u p l o i d l i n e w i t hc h r o m o s o m en u m b e r2 n = 3 2 ,w a ss o r t e do u tf r o ms e l f - c

16、r o s s e dp r o g e n i e s .T h el i n e h a sah i g ha v e r a g e df e r t i l i t yu pt o9 2 .0 ±4 .3 %,w h i c hi s t h es a m ea st h eo n eo fi t s p a r e n t .I na g r o n o m i ct r a i t s ,i t w a sb e

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