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1、目的:動(dòng)態(tài)觀察大鼠角膜堿燒傷后 TLR2、TLR4與炎性因子IL-1β、TNF-α的表達(dá)情況及變化規(guī)律,分析TLRs與炎性因子IL-1β、TNF-α的表達(dá)是否存在相關(guān)關(guān)系。
方法:選用健康排除眼前節(jié)疾病的SPF級(jí)SD(Sprague Dawley)大鼠32只,右眼為燒傷實(shí)驗(yàn)眼,左眼為正常對(duì)照眼,用濃度為1mol/l NaOH建立III級(jí)角膜堿燒傷模型,隨機(jī)分組為3天組、7天組、14天組、21天組,每組8眼。分別在模型制作后3天
2、、7天、14天、21天觀察并拍照大鼠眼前段,評(píng)估其角膜炎癥指數(shù),然后在相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)摘取各組大鼠眼球,制作成病理組織切片行HE染色,觀察角膜組織病理變化,計(jì)算炎癥細(xì)胞數(shù),同時(shí)用蛋白印跡法檢測(cè)大鼠角膜中TLR2、TLR4、IL-1β、TNF-α表達(dá)情況,分析各組差異,評(píng)估TLRs與炎性因子的相關(guān)性。
結(jié)果:1.3天組、7天組、14天組、21天組各組大鼠角膜炎癥指數(shù)分別是(0.750±0.051)、(0.820±0.057)(0.63
3、9±0.078)、(0.264±0.057),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。炎癥細(xì)胞計(jì)數(shù)分別為(71.00±2.646)、(90.33±1.528)、(54.33±2.082)、(41.00±2.646)個(gè)/高倍視野,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P<0.05)。在正常大鼠角膜中可檢測(cè)到TLR2、TLR4、IL-1β、TNF-α蛋白少量表達(dá),且其在堿燒傷后TLR2、TLR4、IL-1β、TNF-α表達(dá)量增加,第7天達(dá)峰值,以后逐漸遞減,各組間
4、比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
2.相關(guān)性分析:炎癥指數(shù)與炎癥細(xì)胞數(shù)為正相關(guān)(r=0.907, P<0.05)。炎癥指數(shù)與IL-1β(r=0.401,P=0.197)、TNF-α(r=0.490,P=0.106)的表達(dá)量相關(guān)程度不顯著。炎癥細(xì)胞數(shù)與IL-1β(r=0.439,P=0.153)、TNF-α(r=0.577,P=0.050)的表達(dá)量相關(guān)程度不顯著。TLR2的表達(dá)量與炎癥指數(shù)(r=0.390,P=0.210)
5、、炎癥細(xì)胞數(shù)(r=0.454,P=0.138)相關(guān)程度不顯著。TLR4的表達(dá)量與炎癥指數(shù)(r=0.394,P=0.206)、炎癥細(xì)胞數(shù)(r=0.472,P=0.122)相關(guān)程度不顯著。TLR2與 IL-1β(r=0.986,P<0.05)、TNF-α(r=0.986, P<0.05)的表達(dá)量為正相關(guān)。TLR4與IL-1β(r=0.975, P<0.05)、TNF-α(r=0.990, P<0.05)的表達(dá)量為正相關(guān)。
結(jié)論:T
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