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文檔簡介
1、目的:探索透明質(zhì)酸(HA)濃度和基質(zhì)細胞衍生因子-1(SDF-1)對制備骨髓間充質(zhì)干細胞(BMSC)球形結(jié)構(gòu)的影響。
方法:將HA凍干無交聯(lián)粉劑和DMEM培養(yǎng)基混后形成不同濃度(1%,2%,3%,4%,5%,10%)的HA膠質(zhì)培養(yǎng)基,并設(shè)置平行對照,以無HA的膠質(zhì)為空白對照。將等量BMSCs分散懸液種植于不同濃度的培養(yǎng)基和對照組中,培養(yǎng)48小時,計數(shù)分散細胞的個數(shù)并分析BMSC球形結(jié)構(gòu)的形成情況,確定制備BMSC球形結(jié)構(gòu)的最佳
2、濃度。Transwell法測定SDF-1趨化BMSCs的最佳濃度,在形成BMSC球形結(jié)構(gòu)的最佳HA膠質(zhì)培養(yǎng)基加入最佳趨化濃度的SDF-1,對照組不添加SDF-1,每組設(shè)置平行對照,培養(yǎng)48小時后分析BMSC球形結(jié)構(gòu)形成情況差異。
結(jié)果:濃度為2%的HA膠質(zhì)培養(yǎng)基中,48小時后可形成均質(zhì)的BMSC球形結(jié)構(gòu),分散細胞數(shù)顯著少于其他實驗組和空白對照組(p<0.05)。Transwell法顯示,SDF-1濃度為75ng/ml時,位于上
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