bFGF和SDF-1預(yù)處理對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化潛能的差異影響.pdf

1、目的:
　　運(yùn)用原位組織工程修復(fù)破壞的牙周組織是牙周組織再生研究領(lǐng)域的新熱點(diǎn)，其中趨化因子的應(yīng)用是原位組織工程的重點(diǎn)。經(jīng)典的趨化因子以基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1(Stromal cell-derived factor-1，SDF-1)為代表，SDF-1能促進(jìn)干細(xì)胞的募集、增殖，是組織再生領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)。有部分研究表明低劑量的堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（Basic fibroblast growth factor，bFGF）同樣具有促進(jìn)干細(xì)胞

2、募集、增殖，且能維持細(xì)胞干性。細(xì)胞因子、趨化因子和粘附分子能夠促進(jìn)干細(xì)胞的募集，運(yùn)用自身募集的干細(xì)胞恢復(fù)缺損組織是近年來(lái)原位組織工程學(xué)(in situ tissueengineering technique)研究的熱點(diǎn)。本研究選取ST2細(xì)胞株來(lái)完成實(shí)驗(yàn)，ST2細(xì)胞株作為從BC8小鼠骨髓中分離出來(lái)的一種間質(zhì)細(xì)胞株，具有骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(Bone marrow mesenchymal stem cells，BMMSCs)的特點(diǎn)，是再生組織領(lǐng)

3、域常用的種子細(xì)胞。雖然兩種因子均能促進(jìn)干細(xì)胞募集和增殖，但募集、增殖的干細(xì)胞需要成骨分化才能發(fā)揮促牙周再生的作用。故了解兩種因子作用后干細(xì)胞的成骨分化潛能對(duì)于原位組織工程中趨化劑的選擇有指導(dǎo)意義。本課題首次探究bFGF和SDF-1預(yù)處理對(duì)BMMSCs（ST2細(xì)胞株）成骨分化潛能的影響。
　　材料和方法:
　　將ST2分別用普通培養(yǎng)基（對(duì)照組）、含20 ng/mlbFGF的培養(yǎng)基和含200ng/mlSDF-1的培養(yǎng)基預(yù)處理48

4、小時(shí)。預(yù)處理后的BMMSCs在成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)3、7、14天， qRT-PCR及Western Blot檢測(cè)BSP、Runx-2和ALP的基因及蛋白表達(dá);28天后進(jìn)行茜素紅染色觀察鈣結(jié)節(jié)的形成。
　　結(jié)果:
　　bFGF預(yù)處理組:第3天時(shí)，ALP和Runx-2 mRNA表達(dá)和ALP蛋白表達(dá)顯著低于對(duì)照組;第7天時(shí)，ALP、BSP和Runx-2 mRNA表達(dá)和ALP蛋白表達(dá)均顯著高于對(duì)照組;14和28天成骨相關(guān)指標(biāo)與對(duì)

5、照組無(wú)顯著差異。
　　SDF-1預(yù)處理組:第3天時(shí)，ALP mRNA和蛋白表達(dá)顯著低于對(duì)照組，而Runx-2蛋白表達(dá)顯著高于對(duì)照組;第7天時(shí)，與對(duì)照組比較，僅ALP蛋白表達(dá)顯著升高;14和28天成骨相關(guān)指標(biāo)與對(duì)照組無(wú)顯著差異。
　　bFGF預(yù)處理組和SDF-1預(yù)處理組相比，第3天時(shí)的ALP mRNA、第7天時(shí)的BSP和Runx-2 mRNA的表達(dá)前者顯著高于后者;第3天時(shí)的Runx-2 mRNA和ALP及Runx-2蛋白的表