藍(lán)蟹性腺發(fā)育過(guò)程中卵巢、肝胰腺和胚胎生化成分變化的研究.pdf

1、藍(lán)蟹(Callinectes sapidus M. J.Rathbun1896)隸屬于節(jié)肢動(dòng)物門(mén)(Arthropoda)、甲殼綱(Crustacea)、軟甲亞綱(Malacostraca)、十足目(Decapoda)、爬行亞目(Reptantia)、短尾派(Brachyura)、方額亞派(Brachyrhyncha)、梭子蟹科(Portunidae)、優(yōu)游蟹屬(Callinectes)。藍(lán)蟹自然分布于從加拿大的新斯科特省到阿根廷的西大西

2、洋沿海，同時(shí)由于引進(jìn)或其他原因進(jìn)入亞洲和歐洲海域。對(duì)于藍(lán)蟹的研究多集中于生態(tài)和分子生物學(xué)方面，而對(duì)于藍(lán)蟹營(yíng)養(yǎng)與繁殖生物學(xué)方面的研究尚未見(jiàn)到報(bào)道，本論文對(duì)藍(lán)蟹性腺發(fā)育過(guò)程中卵巢、肝胰腺和胚胎生化成分變化進(jìn)行了系統(tǒng)的研究。
　　 對(duì)成熟雌性藍(lán)蟹肌肉、卵巢和肝胰腺的生化成分進(jìn)行了分析。分析所用藍(lán)蟹的平均重量為137g，平均殼長(zhǎng)5.76cm，平均殼寬14.68cm，肝胰腺指數(shù)(HSI)3.49,性腺指數(shù)(GSI)13.41，肌肉指數(shù)(M

3、I)28.89。結(jié)果表明：成熟藍(lán)蟹卵巢中水分含量較低(53.24％)，和肌肉、肝胰腺中的水分含量存在顯著性差異(P＜0.05)。肌肉中蛋白質(zhì)含量很高，高達(dá)87.41％，其次是卵巢(69.59％)和肝胰腺(51.20％),三者間存在顯著性差異。總脂含量肝胰腺最高(36.98％)，其次是卵巢(28.94％),最低的是肌肉(5.54％)。肝胰腺、卵巢和肌肉的共同主要脂肪酸(大于4％)為C16：0、C18:0、C18:1n9、C20:5n3(E

4、PA)、C22:6n3(DHA)。肌肉中的EPA和DHA的百分比遠(yuǎn)大于肝胰腺和卵巢。C14:0、C20:1n7和C20:1n9在肝胰腺中的含量最高。肌肉中的飽和脂肪酸(SFA)和單不飽和脂肪酸(MUFA)含量最低，而多不飽和脂肪酸(PUFA)的含量最高。肌肉中n-3系列不飽和脂肪酸含量豐富。成熟藍(lán)蟹的甘油三酯(TG)、游離脂肪酸(FFA)和極性脂(PL)在肌肉、肝胰腺和卵巢組織中存在顯著性差異(P＜0.05)，甘油二酯(DG)和甘油一酯

5、(MG)在三種組織中含量很低，在1％以下。
　　 藍(lán)蟹的胚胎在卵黃囊中發(fā)育，黏附在雌蟹腹部附肢的剛毛上。在水溫為28℃的條件下，依靠卵黃進(jìn)行發(fā)育，10～13d脫離卵黃囊，成為自由游泳的Ⅰ期溞狀幼體。對(duì)藍(lán)蟹胚胎到溞狀幼體期的生化成分如水分、蛋白質(zhì)、脂肪、總糖、脂肪酸和脂類(lèi)變化進(jìn)行了研究。結(jié)果表明，在胚胎順序發(fā)育過(guò)程中，從卵裂開(kāi)始(階段Ⅰ)到孵化前胚胎(階段Ⅱ)再到初孵溞狀幼體(階段Ⅲ)的蛋白質(zhì)、脂肪和總糖含量分別下降顯著(P＜0.

6、05)，而水分含量從階段Ⅰ到階段Ⅱ有顯著的上升(P＜0.05)。在3個(gè)發(fā)育階段，主要的脂肪酸均是C16:0、C16:1n7、C18:0、C18:1n9、C20:5n3(EPA)和C22:6n3(DHA)，它們占總脂的百分比均超過(guò)5％?？傦柡椭舅岜壤?SFA)從階段Ⅰ到階段Ⅱ顯著下降(P＜0.05)，到階段Ⅲ的時(shí)候又返回到階段Ⅰ的水平，而總單不飽和脂肪酸(MUFA)、n-3/n-6和DHA/EPA在階段Ⅰ到階段Ⅱ顯著下降(P＜0.05)

7、，階段Ⅲ的時(shí)候保持在階段Ⅱ的水平上。總多不飽和脂肪酸(PUFA)、PUFA/SFA和n-3PUFA在3個(gè)發(fā)育階段沒(méi)有顯著性差異。n-6PUFA從階段Ⅰ到階段Ⅱ顯著增加，在階段Ⅲ的時(shí)候保持在階段Ⅱ的水平。脂類(lèi)分析結(jié)果顯示，在胚胎發(fā)育過(guò)程中，甘油三酯(TG)下降顯著(P＜0.05)，而膽固醇(CHO)顯著上升。游離脂肪酸(FFA)從階段Ⅰ到階段Ⅱ顯著增加，而從階段Ⅱ到階段Ⅲ顯著下降。磷脂(PL)從階段Ⅰ到階段Ⅱ顯著減少，然后在階段Ⅲ的時(shí)候返

8、回到階段Ⅰ的水平。這些數(shù)據(jù)表明，階段Ⅱ和階段Ⅲ比階段Ⅰ需要更多的能量。
　　 對(duì)弗吉尼亞(Virginia)和弗羅里達(dá)(Florida)攜帶原腸期和孵化前期胚胎的雌性藍(lán)蟹的參數(shù)進(jìn)行了測(cè)量。對(duì)弗吉尼亞和弗羅里達(dá)抱卵藍(lán)蟹在繁殖季節(jié)的卵巢和肝胰腺以及原腸期和孵化前期胚胎的生化成分進(jìn)行了比較分析。結(jié)果表明，兩地抱卵蟹的體重(WW)、殼長(zhǎng)(CL)、包含兩棘的殼寬(CW+S)、肝胰腺指數(shù)(HSI)、卵巢指數(shù)(GSI)和肌肉指數(shù)(MI)分別在

9、146.67～188.95g,5.37～6.11cm,13.32～15.44cm,3.41～9.67,1.06～5.37和27.30～30.40之間，上述數(shù)據(jù)在兩個(gè)群體間無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。兩地雌性藍(lán)蟹的卵巢和肝胰腺的常規(guī)生化成分如水分、脂肪、蛋白和總糖除了粗脂肪以外均無(wú)顯著性差異。兩地抱卵蟹卵巢所含的主要脂類(lèi)是PL,含量在45.95％～77.46％之間，而在肝胰腺中，除了攜帶孵化前期胚胎的弗羅里達(dá)抱卵蟹以外，主要脂類(lèi)是甘油三

10、酯(TG)。兩地抱卵蟹卵巢的SFA、MUFA、PUFA、HUFA、n-3、n-6、n-3/n-6和DHA/EPA均無(wú)顯著性差異。攜帶孵化前期胚胎的兩地抱卵蟹肝胰腺中的SFA、MUFA和DHA/EPA存在顯著性差異。弗吉尼亞單卵胚胎水分、蛋白、脂肪和總糖含量超過(guò)弗羅里達(dá)胚胎，但是除了蛋白質(zhì)以外，無(wú)顯著性差異。弗吉尼亞藍(lán)蟹胚胎體積大于弗羅里達(dá)。弗吉尼亞原腸期胚胎的FFA和TG含量超過(guò)弗羅里達(dá)原腸期胚胎。兩地孵化前期胚胎的TG、FFA和CHO

11、含量不同，但PL含量一致。C16:0,C16:1n7,C18:1n9,EPA和DHA是兩地各期胚胎的主要脂肪酸。兩地孵化前期胚胎的SFA含量均最高，其次是PUFA。兩地原腸期胚胎的SFA、PUFA、n-3和PUFA/SFA的百分比無(wú)顯著性差異，但是在孵化前期，除了DHA/EPA而外，存在顯著性差異。
　　 應(yīng)用形態(tài)學(xué)指標(biāo)(性腺指數(shù)GSI和肝胰腺指數(shù)HSI)對(duì)首次性腺發(fā)育的雌性藍(lán)蟹(Callinectes sapidus)的主要生

12、化成分(蛋白質(zhì)、脂肪、糖)的變化進(jìn)行了研究。結(jié)果顯示：在藍(lán)蟹首次性腺發(fā)育過(guò)程中，GSI和HSI呈顯著負(fù)相關(guān)性(P＜0.01)；卵巢中的蛋白質(zhì)含量和GSI呈顯著正相關(guān)(P＜0.05)；卵巢中的脂肪含量隨著卵巢的發(fā)育成熟而增加，具有顯著相關(guān)性(P＜0.05)；肝胰腺中的蛋白質(zhì)含量隨GSI的增加略有下降，相關(guān)性不顯著(P＞0.05)；肝胰腺中的脂肪含量隨GSI的上升而下降，有顯著相關(guān)性(P＜0.05)；肝胰腺中的糖含量隨GSI的增加略有增加，

13、相關(guān)性不顯著(P＞0.05)。
　　 應(yīng)用卵巢指數(shù)(GSI)和肝胰腺指數(shù)(HSI)以及卵巢和肝胰腺的生化成分變化對(duì)藍(lán)蟹卵巢二次發(fā)育進(jìn)行了研究。結(jié)果表明，在藍(lán)蟹卵巢二次發(fā)育過(guò)程中，GSI和HSI之間無(wú)顯著相關(guān)性(P＞0.05)。卵巢中的水分含量(P＜0.05)與GSI呈顯著負(fù)相關(guān)；GSI和卵巢中的蛋白質(zhì)含量呈顯著正相關(guān)(P＜0.01);GSI和肝胰腺中的蛋白質(zhì)和脂肪含量無(wú)相關(guān)性(P＞0.05)。雌性藍(lán)蟹卵巢和肝胰腺生化成分的動(dòng)態(tài)變

14、化和對(duì)其他十足類(lèi)甲殼動(dòng)物研究結(jié)果一致。藍(lán)蟹第二次卵巢發(fā)育和肝胰腺主要生化成分的變化趨勢(shì)和第一次發(fā)育相似。
　　 對(duì)藍(lán)蟹二次卵巢發(fā)育過(guò)程中的主要脂肪酸和脂類(lèi)的變化進(jìn)行了研究，脂肪酸占總脂肪酸比例大于4％的作為主要脂肪酸(8種)，脂類(lèi)占總脂大于5％的作為主要脂類(lèi)(4種)進(jìn)行分析。結(jié)果表明，在藍(lán)蟹卵巢二次發(fā)育過(guò)程中，C16:0(P=0.005,n=19)、C16:1n7(P=0.004,n=19)和C22:6n3(P=0.029,n=

15、19)隨著卵巢指數(shù)的增加而增加，并且和卵巢指數(shù)之間存在顯著相關(guān)性；C18:0(P=0.009,n=19)、C18:1n7(P=0.05,n=19)和C20:4n6(P=0.001,n=19)隨著卵巢指數(shù)的增加而減少，并且和卵巢指數(shù)之間存在顯著相關(guān)性；C18:1n9(P=0.228,n=19)和C20:5n3(P=0.152,n=19)的比例隨著卵巢指數(shù)的增加略有減少，和卵巢指數(shù)之間不存在顯著相關(guān)性。甘油三酯(TG)(P=:0.000,n