生物膜對耐亞胺培南鮑曼不動(dòng)桿菌中苯唑西林酶和AdeABC外排泵基因表達(dá)的影響.pdf

1、目的：
　　1、通過對OXA、AdeABC、CarO基因及生物膜形成在臨床分離的亞胺培南耐藥和敏感鮑曼不動(dòng)桿菌中的分布特性的研究，進(jìn)一步探討鮑曼不動(dòng)桿菌對亞胺培南的耐藥機(jī)制。
　　2、通過生物膜對苯唑西林酶(OXA)和AdeABC外排泵基因表達(dá)的影響研究，揭示生物膜的形成對OXA和AdeABC外排泵相關(guān)耐藥機(jī)制的影響，探討生物膜在鮑曼不動(dòng)桿菌對亞胺培南耐藥方面的作用機(jī)制及作用方式。
　　方法：
　　運(yùn)用多重PCR

2、及PCR技術(shù)對2014年11月-2015年4月寧夏醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院臨床分離并經(jīng)鑒定和確認(rèn)的106株亞胺培南耐藥和102株亞胺培南敏感的鮑曼不動(dòng)桿菌分別進(jìn)行OXA、AdeABC、CarO基因的檢測；采用微量滴定板法模擬生物膜在體內(nèi)的生長制備生物膜模型及定量實(shí)驗(yàn)；實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)對不同狀態(tài)下OXA-23、AdeB基因表達(dá)量進(jìn)行檢測；E-test方法對產(chǎn)膜與非產(chǎn)膜菌株亞胺培南的最低抑菌濃度（MIC）進(jìn)行測定。
　　結(jié)果：
　　

3、1、OXA-23在亞胺培南耐藥和敏感菌株中的檢出率分別為99.1%和2.9%，經(jīng)卡方檢驗(yàn)P<0.05；在所有檢測菌株中OXA-51基因均被檢出，而OXA-58基因均未被檢出；OXA-24基因僅在一株耐藥菌株中檢出。相反，AdeABC基因在耐藥和敏感菌株分布具有較大差異，AdeA、AdeB、AdeC基因及三個(gè)基因共存在耐藥菌株中的檢出率均為98.1%（104/106），而敏感菌株中AdeA、AdeB、AdeC的檢出率分別為64.7%（66

4、/102）、82.4%（84/102）、66.7%（68/102），三個(gè)基因共存的檢出率僅為64.7%（66/102），P<0.05。CarO基因的檢出率較高，分別為97.2%（103/106）和99.0%（101/102），P>0.05。產(chǎn)生物膜菌株在亞胺培南耐藥和敏感菌株中均具有較高的比重，分別為67.9%和75.5%,P>0.05。
　　2、106株亞胺培南耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌中產(chǎn)生物膜和不產(chǎn)生物膜菌株分別占67.9%和32.1

5、%；生物膜狀態(tài)下的菌株OXA-23、AdeB基因的相對表達(dá)量明顯高于普通肉湯培養(yǎng)和浮游狀態(tài)下基因的相對表達(dá)量（P<0.05）；產(chǎn)膜比非產(chǎn)膜菌株亞胺培南MIC更高，P<0.05結(jié)論鮑曼不動(dòng)桿菌的生物膜形成能夠促進(jìn)OXA-23和AdeABC外排泵基因的表達(dá)，從而增強(qiáng)鮑曼不動(dòng)桿菌對亞胺培南的耐藥性。
　　結(jié)論：
　　1、OXA-51基因是所有亞胺培南耐藥和敏感菌株共有的基因,OXA-23基因是除OXA-51外最流行的基因,是該醫(yī)院

6、耐亞胺培南鮑曼不動(dòng)桿菌的最主要OXA亞型，提示其在鮑曼不動(dòng)桿菌對碳青霉烯類抗生素耐藥機(jī)制中起到了重要的作用；AdeABC基因在耐藥和敏感菌株分布具有較大差異，AdeABC外排泵在降低鮑曼不動(dòng)桿菌對亞胺培南的敏感性，增強(qiáng)細(xì)菌耐藥性方面起著重要作用；CarO基因幾乎在全部菌株中被發(fā)現(xiàn)，外膜蛋白CarO的改變對于降低鮑曼不動(dòng)桿菌對亞胺培南的敏感性的可能性不大；臨床鮑曼不動(dòng)桿菌所引發(fā)的的感染多數(shù)與生物膜的形成有關(guān)。
　　2、鮑曼不動(dòng)桿菌的