PPARγ激動(dòng)劑的設(shè)計(jì)、合成及其抗糖尿病活性研究.pdf

1、背景：
　　隨著社會(huì)的發(fā)展糖尿病(DM)患病人群越來(lái)越多，年輕化趨勢(shì)越來(lái)越明顯，給人類(lèi)社會(huì)帶來(lái)了極大的危害，尤其高血糖可能引發(fā)心腦血管疾病、腎衰竭、失明、截肢等嚴(yán)重并發(fā)癥。其中Ⅱ型糖尿病(T2DM)患者的比率占到了95％，成為糖尿病研究的主要方向，Ⅱ型糖尿病的病因主要是由于骨骼肌、脂肪和肝臟組織產(chǎn)生了胰島素抵抗(IR)，不能充分正常的利用胰島素，從而導(dǎo)致糖代謝的失衡，引發(fā)高血糖和及其并發(fā)癥。PPARγ是研究胰島素抵抗的關(guān)鍵靶點(diǎn)之一

2、，它自身激活后會(huì)促進(jìn)基因轉(zhuǎn)錄翻譯，表達(dá)調(diào)節(jié)生命物質(zhì)新陳代謝的調(diào)節(jié)蛋白，其中就包括CAP等蛋白，CAP與Cbl連接蛋白結(jié)合可以正向調(diào)控胞外葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)到胞內(nèi)，增強(qiáng)細(xì)胞對(duì)胰島素的應(yīng)答能力。而市場(chǎng)上常用的PPARγ激動(dòng)劑種類(lèi)少且毒副反應(yīng)較大，因此新型PPARγ激動(dòng)劑藥物的研發(fā)變得十分迫切。
　　目的：
　　1、運(yùn)用計(jì)算機(jī)輔助藥物設(shè)計(jì)（CADD）的方法設(shè)計(jì)新型PPARγ激動(dòng)劑化合物2、分析PPARγ激動(dòng)劑化合物結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和理化性質(zhì)并合成

3、得到目的先導(dǎo)化合物3、對(duì)設(shè)計(jì)合成的PPARγ激動(dòng)劑化合物的進(jìn)行抗糖尿病生物活性研究
　　方法：
　　1、根據(jù)4EMA和2XKW兩個(gè)PPARγ蛋白結(jié)構(gòu)，通過(guò)Discovery Studio3.0(DS3.0)和SybylX-2.0軟件中的Libdock、CDOCKER和Surflex-Dock的對(duì)接模塊對(duì)chembl和drugbank數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行虛篩，分析數(shù)據(jù)選出最優(yōu)的先導(dǎo)化合物。
　　2、合成PPARγ激動(dòng)劑候選先導(dǎo)化合

4、物結(jié)構(gòu)
　　3、運(yùn)用飼喂高脂高糖鼠糧、腹腔注射鏈脲佐菌素（STZ）的誘導(dǎo)方法構(gòu)建II型糖尿病Sprague-Dawley(SD)大鼠模型。
　　4、先導(dǎo)化合物以灌胃的方法作用于Ⅱ型糖尿病模型大鼠，采血、摘取肝臟、胰臟、骨骼肌、脂肪組織測(cè)定其生理指標(biāo)、INS激素水平的變化，觀(guān)察肝臟、胰臟的病理變化。
　　5、構(gòu)建3T3-L1細(xì)胞胰島素抵抗模型。
　　6、先導(dǎo)化合物作用于胰島素抵抗的3T3-L1細(xì)胞后，測(cè)定細(xì)胞葡萄糖

5、消耗量的變化。
　　7、測(cè)定藥物對(duì)Ⅱ型糖尿病大鼠血清、肝臟、骨骼肌、脂肪組織中PPARγ蛋白表達(dá)量變化的影響。
　　結(jié)果：
　　1、虛擬篩選得到打分函數(shù)較高的先導(dǎo)化合物794ap。
　　2、合成得到先導(dǎo)化合物794ap。
　　3、構(gòu)建II型糖尿病SD大鼠模型的成功率為70%
　　4、試驗(yàn)過(guò)程中多次測(cè)定尾靜脈血糖值時(shí)發(fā)現(xiàn)，3mg/mL濃度的794ap可明顯降低血糖，測(cè)定Ⅱ型糖尿病模型大鼠葡萄糖耐受時(shí)發(fā)現(xiàn)

6、最優(yōu)藥物濃度也為3mg/mL。
　　5、可降低血清、肝臟組織勻漿中TG、TCH含量，最優(yōu)藥物濃度為5mg/mL。
　　6、可以降低血清中FFA含量和INS胰島素水平，最優(yōu)濃度為1mg/mL。
　　7、可改善肝臟、胰臟器官的病變現(xiàn)象。
　　8、可提高胰島素抵抗的3T3-L1細(xì)胞的葡萄糖消耗量，最優(yōu)藥物濃度為1.5nmol/L。
　　9、綜合考慮脂肪、骨骼肌、肝臟中PPARγ蛋白的表達(dá)量，發(fā)現(xiàn)5 mg/mL藥物