單個核細胞與骨肉瘤細胞之間相互作用的研究.pdf

1、[目的]
　　體外建立骨肉瘤HOS細胞與臍血單個核細胞共培養(yǎng)模型，觀察共培養(yǎng)微環(huán)境中炎癥因子TGF-β、IL-6、IL-10的濃度變化對骨肉瘤HOS細胞生物學性狀的影響。
　　[方法]
　　1.提取臍血單個核細胞，與骨肉瘤HOS細胞共培養(yǎng)3、5、7d，共培養(yǎng)組為實驗組，兩種細胞單純培養(yǎng)設為對照組。
　　2.應用ELISA技術檢測各組上清液中細胞因子TGF-β、IL-6、IL-10的含量變化。
　　3.應用t

2、ranswell小室培養(yǎng)法、MTT法檢測各組骨肉瘤HOS細胞侵襲、遷移及增殖能力等生物學性狀的變化。
　　4.應用SPSS13.0軟件統(tǒng)計分析，計量資料用均數(shù)±標準差(Mean±SD)描述,數(shù)據(jù)進行正態(tài)性檢驗，兩組間比較采用獨立樣本 t檢驗；多組間比較采用單因素方差分析，以P<0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。
　　[結果]
　　1.在共培養(yǎng)的第1d，腫瘤細胞周圍有大量的單個核細胞聚集，腫瘤細胞狀態(tài)欠佳；隨著共培養(yǎng)時間的延

3、長，相比對照組，共培養(yǎng)組單個核細胞逐漸減少，而腫瘤細胞生長旺盛。
　　2.骨肉瘤HOS細胞能夠自身分泌較高濃度的細胞因子TGF-β，而臍血單個核細胞分泌的TGF-β的量甚少；兩種細胞共培養(yǎng)后3d，共培養(yǎng)組的TGF-β濃度明顯高于HOS組（p<0.05）；共培養(yǎng)5d，兩組相差無統(tǒng)計學意義；共培養(yǎng)7d，共培養(yǎng)組的TGF-β濃度明顯低于HOS組（p<0.05）。另外，正常情況下單個核細胞分泌極微量TGF-β。
　　3.共培養(yǎng)組 I

4、L-6、IL-10的濃度明顯高于同一觀察點的對照組（p<0.05），也高于同一時間點的單個核細胞培養(yǎng)組，其中共培養(yǎng)第3天，共培養(yǎng)組與單個核細胞對照組差別有顯著性意義（p<0.01）。共培養(yǎng)7天，微環(huán)境中IL-6濃度均大于對照組。另外，骨肉瘤細胞對照組分泌極少量IL-10。
　　4.共培養(yǎng)第3d，共培養(yǎng)組骨肉瘤HOS細胞的遷移、侵襲數(shù)量減少，增殖能力明顯受抑制；共培養(yǎng)第5d，培養(yǎng)組與對照組骨肉瘤HOS細胞的遷移、侵襲及增殖能力差異無