Interleukin-34對巨噬細胞源性泡沫細胞形成的調控研究.pdf

1、研究背景:
　　巨噬細胞和血管平滑肌細胞吞噬脂質(特別是氧化低密度脂蛋白oxidizedLow-density Lipoprotein，ox-LDL)形成泡沫細胞(Foam Cell)是動脈粥樣硬化(Atherosclerosis，AS)病理過程的中心環(huán)節(jié)，貫穿在早期脂紋形成到斑塊破裂的整個過程。多種細胞因子可調節(jié)泡沫細胞的形成。白介素-34(Interleukin-34，IL-34)是2008年發(fā)現的一種新細胞因子，與類風濕關節(jié)

2、炎(Rheumatoid Arthritis，RA)、潰瘍性結腸炎(Ulcerative Colitis，UC)等多種慢性免疫性炎癥疾病患者有明顯相關性，被認為是一種致炎因子。近來研究發(fā)現其在冠狀動脈粥樣硬化患者血清水平中高表達，且與冠脈病變嚴重程度呈正相關性。
　　研究目的:
　　IL-34在冠狀動脈粥樣硬化性心臟病等慢性炎癥疾病患者血清水平中高表達，提示其可能是一種致炎因子，而IL-34是否影響泡沫細胞的形成還未見報道，

3、因此探究IL-34對泡沫細胞形成的影響及探究其可能的機制，為進一步闡明動脈粥樣硬化病理過程可能的機制、尋找新的臨床治療靶點提供重要線索。
　　研究方法與結果:
　　1.本研究首先利用ox-LDL誘導原代小鼠骨髓源性巨噬細胞(BoneMarrow-derived Macrophages，BMDMs)，建立體外巨噬細胞源性泡沫細胞模型。將細胞分為對照組、oxLDL組(40μ g/ml)、低劑量組(oxLDL40μg/ml+IL-

4、3420 ng/nl)、高劑量組(oxLDL40μ g/ml+IL-3450 ng/ml)。油紅O染色及測定細胞內膽固醇含量，觀察每組泡沫細胞形成情況，結果顯示高劑量組(IL-3450 ng/ml)泡沫細胞形成明顯加重，而低劑量組(IL-3420 ng/ml)與oxLDL組相比未見明顯變化，提示IL-3450 ng/ml可以促進泡沫細胞的形成。因此，接下來我們的實驗均基于IL-3450 ng/ml探究其對泡沫細胞形成的影響。
　　

5、2.泡沫細胞的形成是脂質攝取與流出的動態(tài)平衡受損。為探究IL-34是通過影響巨噬細胞哪個過程促進泡沫細胞的形成，我們分別檢測了巨噬細胞脂質攝取及膽固醇流出過程，結果表明:IL-34增加巨噬細胞脂質的攝?。ú町愑薪y(tǒng)計學意義），而不影響膽固醇的流出過程。
　　3.巨噬細胞主要通過細胞表面的清道夫受體攝取脂質。利用westernblot技術、RT-PCR技術分別檢測四組細胞清道夫受體CD36、SR-A、Lox-1的蛋白、mRNA表達水平

6、，結果提示只有CD36的表達顯著上調（有統(tǒng)計學差異）。利用特異性抗體阻斷CD36受體，IL-34誘導不能增加巨噬細胞脂質的攝取。結果提示:IL-34是通過上調巨噬細胞清道夫受體CD36的表達而增加脂質的攝取。另外，IL-34能夠使增加oxLDL誘導的細胞炎癥因子IL-6、TNF-α、IL-1β分泌，炎癥反應的加重可能與脂質攝取過程協(xié)同加重泡沫細胞的形成。
　　4.為研究IL-34調節(jié)巨噬細胞脂質攝取過程的下游信號轉導通路，我們利用