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文檔簡介
1、目的:探討組蛋白H3精氨酸單ADP核糖基化對人結腸癌LOVO細胞侵襲能力的影響及分子機制。
方法:本研究將未轉染LOVO細胞(未轉染組)和慢病毒空載體轉染LOVO細胞(空載體組)設為對照組,精氨酸點突變?yōu)楸彼岬穆《据d體轉染LOVO細胞(Arg117Ala組)和精氨酸點突變?yōu)橘嚢彼岬穆《据d體轉染LOVO細胞(Arg117Lys組)設為實驗組。Transwell侵襲實驗觀察各組LOVO細胞的侵襲能力。 Western blo
2、t測定各組細胞H3K9me2、Runx3、β-catenin和MMP7的表達變化;定量PCR檢測Runx3的mRNA水平。
結果:
?。?)組蛋白H3精氨酸單ADP核糖基化對LOVO細胞侵襲能力的影響:Transwell侵襲實驗檢測對照組與實驗組的侵襲能力,結果顯示,與對照組相比,Arg117Ala組和Arg117Lys組降解Matrigel基質膠穿過小室的細胞數(shù)明顯減少(P<0.01)。Arg117Ala組和Arg1
3、17Lys組無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。
?。?)組蛋白H3精氨酸單ADP核糖基化影響LOVO細胞侵襲能力的分子機制:Western blot方法檢測未轉染組、空載體組、Arg117Ala組和Arg117Lys組LOVO細胞H3K9me2、Runx3、β-catenin和MMP7的表達情況,結果顯示,與對照組相比,Arg117Ala組與Arg117Lys組H3K9me2、β-catenin和 MMP7蛋白表達降低,Runx3蛋
4、白表達升高(P<0.01),Arg117Ala組與Arg117Lys組無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。定量 PCR方法檢測未轉染組、空載體組、Arg117Ala組和 Arg117Lys組 LOVO細胞 Runx3的 mRNA水平,結果顯示,與對照組相比, Arg117Ala組與Arg117Lys組Runx3的mRNA水平升高(P<0.01)。Arg117Ala組與Arg117Lys組無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。
結論:組蛋白H
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