單-ADP-核糖基轉(zhuǎn)移酶3基因?qū)θ巳橄侔┰鲋?、調(diào)亡及侵襲的影響.pdf

1、本文從以下幾部分進(jìn)行了論述。
　　第一部分單-ADP-核糖基轉(zhuǎn)移酶3基因過表達(dá)對(duì)人乳腺癌細(xì)胞增殖、凋亡及侵襲的影響。
　　目的:探討人單-ADP-核糖基轉(zhuǎn)移酶3（ART3，mono-ADP-ribosyltransferase3）基因?qū)θ橄侔┘?xì)胞(MDA-MB-231)增殖、凋亡、侵襲的影響。
　　方法:將人ART3基因重組真核質(zhì)粒pCMV-ART3-myc-tag轉(zhuǎn)染入人乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231，以G418進(jìn)行

2、穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株篩選。采用Western blot法檢測(cè)穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞中ART3蛋白的表達(dá);MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖活力;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡;Transwell法檢測(cè)細(xì)胞侵襲能力。
　　結(jié)果:ART3基因在MDA-MB-231細(xì)胞中穩(wěn)定過表達(dá)。ART3轉(zhuǎn)染組細(xì)胞增殖和侵襲能力均高于未轉(zhuǎn)染組(P＜0.05);同時(shí)ART3過表達(dá)組細(xì)胞凋亡率明顯低于未轉(zhuǎn)染組(P＜0.05)。
　　結(jié)論:本實(shí)驗(yàn)成功構(gòu)建ART3基因穩(wěn)定過表達(dá)人乳腺癌 M

3、DA-MB-231細(xì)胞模型，且ART3基因能促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞增殖、侵襲并抑制凋亡，為進(jìn)一步研究該基因在乳腺癌發(fā)生發(fā)展中的作用奠定了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
　　第二部分單-ADP-核糖基轉(zhuǎn)移酶3基因?qū)θ巳橄侔┘?xì)胞裸鼠移植瘤生長(zhǎng)的影響。
　　目的:探討單-ADP-核糖基轉(zhuǎn)移酶3基因?qū)DA-MB-231細(xì)胞裸鼠移植瘤生長(zhǎng)的影響。
　　方法:用過表達(dá)ART3基因的MDA-MB-231乳腺癌細(xì)胞與未轉(zhuǎn)染的MDA-MB-231細(xì)胞構(gòu)建裸鼠移植

4、瘤模型，成瘤后每3天對(duì)腫瘤體積進(jìn)行測(cè)量，并根據(jù)數(shù)據(jù)繪制腫瘤生長(zhǎng)曲線。成瘤30天后處死裸鼠，提取腫瘤組織中蛋白作western blot檢測(cè)ART3表達(dá)情況。
　　結(jié)果:裸鼠移植瘤模型構(gòu)建成功，根據(jù)裸鼠移植瘤生長(zhǎng)曲線，過表達(dá)ART3組移植瘤生長(zhǎng)速度快與未轉(zhuǎn)染ART3組，腫瘤組織蛋白western blot結(jié)果顯示過表達(dá)ART3移植瘤中ART3表達(dá)顯著強(qiáng)于未轉(zhuǎn)染組。
　　結(jié)論:成功構(gòu)建的裸鼠移植瘤模型中，ART3基因能促進(jìn)MDA