正常小鼠外周成熟T細(xì)胞回歸胸腺及其功能表達(dá)的探究.pdf

1、在對胸腺的功能研究中，一直把胸腺當(dāng)作一個(gè)免疫“特赦”器官看待，抗原和大分子不能進(jìn)入胸腺從而避免了胸腺內(nèi)發(fā)生免疫反應(yīng)。根據(jù)中樞耐受理論，如果在胸腺內(nèi)植入外界抗原，那么該抗原將會(huì)被發(fā)育中的T細(xì)胞識(shí)別并對陽性選擇和陰性選擇產(chǎn)生影響進(jìn)而形成耐受。根據(jù)我們先前的研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)把腫瘤細(xì)胞注射到胸腺后，并沒有誘導(dǎo)形成腫瘤細(xì)胞的耐受，腫瘤細(xì)胞最終會(huì)被清除。并且流式分析顯示，在注射人肺癌細(xì)胞A549后，胸腺內(nèi)CD4+、CD8+T細(xì)胞的數(shù)量增加。那么這些增多

2、的淋巴細(xì)胞會(huì)不會(huì)是來自于外周呢？在給免疫缺陷小鼠移植T細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，異體的成熟T細(xì)胞可以進(jìn)入胸腺，但正常小鼠的外周成熟T細(xì)胞是否也具有這種現(xiàn)象還不確定。
　　因此針對以上問題，我們選用正常小鼠作為實(shí)驗(yàn)對象，首先在其脾臟中注射CFDA SE熒光染料，通過流式檢測胸腺內(nèi)是否含有表達(dá)CFDA SE熒光信號的細(xì)胞，檢測外周T細(xì)胞能遷回胸腺;其次我們在外周免疫過人肺癌細(xì)胞A549抗原的小鼠和未免疫小鼠的胸腺中分別注射等量的A549細(xì)胞，

3、通過石蠟切片和流式細(xì)胞術(shù)分析對比胸腺內(nèi)發(fā)生的免疫反應(yīng)、抗原細(xì)胞在胸腺內(nèi)的狀態(tài)以及T細(xì)胞亞群含量的變化，并對發(fā)生于胸腺的應(yīng)答反應(yīng)做進(jìn)一步探究。
　　通過以上實(shí)驗(yàn)，我們得到以下結(jié)果:
　　1.胸腺內(nèi)可以檢測到CFDA SE陽性細(xì)胞，并且這些細(xì)胞絕大多數(shù)呈CD3陽性;
　　2.石蠟切片結(jié)果顯示，免疫小鼠的胸腺內(nèi)發(fā)生的免疫反應(yīng)較未免疫小鼠更加劇烈，胸腺在相對較短的時(shí)間內(nèi)即可恢復(fù)正常;
　　3.流式分析結(jié)果顯示，與未免疫小

4、鼠相比，A549細(xì)胞在免疫小鼠胸腺內(nèi)的存活時(shí)間縮短;
　　4.胸腺微創(chuàng)注射后第5天，外周免疫小鼠和未免疫小鼠與未進(jìn)行胸腺微創(chuàng)注射的小鼠相比，胸腺中CD4+和CD8+T細(xì)胞的數(shù)量都明顯增加，但免疫小鼠的胸腺中CD8+/CD4+的比值較未免疫小鼠顯著升高，而未免疫小鼠與未進(jìn)行胸腺微創(chuàng)注射的小鼠之間無明顯差異。
　　通過以上結(jié)果，我們得出以下結(jié)論:
　　1.正常小鼠的胸腺內(nèi)存在來自外周的T細(xì)胞。這種回遷現(xiàn)象不僅發(fā)生于免疫缺陷