大黃素生物素酯的合成、表征及抑菌機(jī)理研究.pdf

1、大黃素(emodin)是一種蒽醌類化合物，主要存在于中草藥虎杖中。大黃素毒副作用低，不易產(chǎn)生耐藥性，且具有抗菌消炎、抗氧化、抗腫瘤等多種生物活性，但因其作用機(jī)理尚不明確限制了大黃素的開(kāi)發(fā)應(yīng)用。作用靶點(diǎn)的分析對(duì)于深入了解藥物的作用機(jī)理及新藥的研發(fā)具有重要的意義。本研究以 DCC低溫催化法、二步酰氯法通過(guò)酯化反應(yīng)連接大黃素與生物素，首次獲得大黃素生物素酯，并以金黃色葡萄球菌為供試菌株，對(duì)大黃素和大黃素生物素酯的抑菌活性進(jìn)行了測(cè)定，同時(shí)對(duì)大黃

2、素、大黃素生物素酯的抑菌機(jī)制進(jìn)行了系統(tǒng)研究，為進(jìn)一步分析大黃素的作用靶點(diǎn)及新型抗菌藥物的研發(fā)奠定理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　結(jié)果顯示大黃素和大黃素生物素酯對(duì)金黃色葡萄球菌都具有較強(qiáng)的抑菌活性，大黃素生物素酯對(duì)金黃色葡萄球菌的最低抑菌濃度為5μg/mL，大黃素的最低抑菌濃度為6μg/mL，同物質(zhì)量濃度的大黃素生物素酯的抑菌活性是大黃素的2.4倍。
　　本研究測(cè)定了細(xì)菌培養(yǎng)液電導(dǎo)率的變化及細(xì)胞內(nèi)DNA和RNA的外滲情況，結(jié)果表明：大黃

3、素、大黃素生物素酯均對(duì)金黃色葡萄球菌的細(xì)胞膜產(chǎn)生了較大的損傷。
　　大黃素、大黃素生物素酯作用金黃色葡萄球菌后，大黃素作用組比對(duì)照組可溶性蛋白含量減小了10.12％，大黃素生物素酯作用組比對(duì)照組可溶性蛋白含量減小了7.89%；大黃素作用組的DNA含量較空白減少了21.4%，大黃素生物素酯作用組的DNA含量比空白減少了5.45%。說(shuō)明大黃素、大黃素生物素酯均可抑制菌體的可溶性蛋白及核酸的合成。
　　此外，大黃素、大黃素生物素酯

4、對(duì)菌體總蛋白含量和菌體外分泌蛋白含量都有明顯的影響。
　　本文采用紫外可見(jiàn)分光光度光譜法研究大黃素、大黃素生物素酯與DNA的相互作用方式。結(jié)果表明大黃素、大黃素生物素酯與金黃色葡萄球菌的DNA分子發(fā)生了相互作用，大黃素、大黃素生物素酯均以嵌插模式與DNA發(fā)生作用。
　　熒光光譜分析顯示，DNA對(duì)大黃素、大黃素生物素酯的熒光產(chǎn)生了猝滅作用，進(jìn)一步表明其嵌入到了DNA的堿基對(duì)之間。
　　大黃素、大黃素生物素酯二者與DNA都