羅哌卡因類脂納米囊制劑及其經(jīng)皮給藥研究.pdf

1、羅哌卡因(Ropivacaine，RPV)是一種新型的長效酰胺類局麻藥，通過抑制神經(jīng)細(xì)胞鈉離子通道，阻斷神經(jīng)興奮與傳導(dǎo)而發(fā)揮麻醉鎮(zhèn)痛作用。羅哌卡因哌啶環(huán)的第三位氮原子上存在丙基取代，為不對稱結(jié)構(gòu)的單鏡像體(single enantiomer)。它是純左旋式異構(gòu)體，其pKa為8.1，分配系數(shù)為2.9，與右旋或其他消旋體相比具有心臟和中樞神經(jīng)系統(tǒng)毒性低，作用時間長等特點。羅哌卡因的脂溶性小，到達(dá)粗大運(yùn)動神經(jīng)的時間拖后，因此形成該藥獨特的作用

2、特點:運(yùn)動與感覺阻滯分離。突出的感覺神經(jīng)與運(yùn)動神經(jīng)阻滯分離特點使羅哌卡因在臨床中更有利于于術(shù)后早期運(yùn)動功能的恢復(fù)。臨床上常用羅哌卡因的鹽酸鹽或甲磺酸鹽注射劑用于外科手術(shù)麻醉或術(shù)后鎮(zhèn)痛，而且兩者的給藥方式均為靜脈滴注或注射給藥，給患者帶來痛苦。為發(fā)揮羅哌卡因在鎮(zhèn)痛方面的優(yōu)勢且解決羅哌卡因的給藥方式的局限性，將羅哌卡因制備成類脂納米囊透皮制劑，實現(xiàn)緩控釋、便攜等目的。本課題的研究內(nèi)容及結(jié)果如下:
　　1.羅哌卡因類脂納米囊的制備工藝及

3、理化性質(zhì)考察
　　根據(jù)預(yù)實驗與文獻(xiàn)報道，選擇相轉(zhuǎn)化法制備羅哌卡因類脂納米囊制劑。以中鏈油為油相、聚乙二醇單硬脂酸酯為表面活性劑、卵磷脂為助表面活性劑、氯化鈉為相轉(zhuǎn)化溫度調(diào)節(jié)劑，以包封率和載藥量為指標(biāo)采用單純型網(wǎng)格法篩選類脂納米囊制劑的最佳處方?；诎饴?、載藥量及制劑穩(wěn)定性，確定最優(yōu)處方為20％中鏈油、30％聚乙二醇單硬脂酸酯、50％水。固定類脂納米囊總組分的用量為1g，根據(jù)比例關(guān)系則處方組成為:15 mg卵磷脂(1.5％)、17

4、.5 mg氯化鈉(1.75％)、200 mg中鏈油(20％)、300 mg聚乙二醇單硬脂酸酯(30％)和500 mg蒸餾水(50％)。按照最優(yōu)處方制備羅哌卡因類脂納米囊制劑，其外觀為均一的淡藍(lán)色有乳光膠體，在透射電鏡下類脂納米囊粒子呈類球形，表面光滑無粘連。平均粒徑為62.1±1.7 nm，多分散指數(shù)0.271。Zeta電位為-11.81mV。差示掃描量熱法分析及X-射線衍射分析結(jié)果表明羅哌卡因成功被被包裹在類脂納米囊基質(zhì)中。體外釋放結(jié)

5、果表明制備的類脂納米囊制劑具有明顯的緩釋作用。
　　2.體外透皮實驗
　　采用昆明小鼠背部皮膚為生物樣本，以Franz擴(kuò)散池法考察制劑的體外透皮性能。結(jié)果表明:類脂納米囊制劑在每個時間點(0.5、1、2、3、6、9、12、24 h)的累積滲透量均高于對照組，體外滲透24 h時，類脂納米囊制劑的皮膚單位面積累積滲透量為349.0士11.5μg·cm-2，是對照組的2.17倍。經(jīng)計算，類脂納米囊制劑和羅哌卡因丙二醇溶液的穩(wěn)態(tài)滲透

6、速率分別為9.058μg·cm-2·h-1和2.163μg·cm-2·h-1，說明類脂納米囊對羅哌卡因有明顯的皮膚滲透促進(jìn)作用。
　　3.在體透皮實驗
　　在體外透皮實驗的基礎(chǔ)上進(jìn)行了在體透皮實驗，分別考察了藥物在動物血漿、表皮、真皮內(nèi)的濃度，考察藥物動力學(xué)同時監(jiān)測給藥部位表皮和真皮內(nèi)藥物滯留量。實驗結(jié)果表明:類脂納米囊制劑組的藥物Cmax為5.743μg/mL，AUC0-12為23.789mg.h/mL，而對照組Cmax為

7、0.81μg/mL，AUC0-12為5.695 mg·h/mL。在6、9、12h時，羅哌卡因丙二醇溶液組在表皮內(nèi)的藥物滯留量高于制劑組，但在真皮組織中，羅哌卡因丙二醇溶液組的藥物滯留量卻較低，12h時藥物滯留量僅為15.6±3.9μg/mL。而羅哌卡因類脂納米囊制劑組12 h藥物滯留量高達(dá)27.9±5.2μg/mL，是丙二醇溶液組的1.79倍;說明丙二醇雖然可以促進(jìn)藥物滲透進(jìn)入表皮，但不能顯著促進(jìn)藥物進(jìn)入真皮組織，因此，藥物大量滯留在皮

8、膚表層而減少了進(jìn)入血液循環(huán)的藥物量。
　　4.納米囊制劑促滲透機(jī)制的研究
　　體內(nèi)外透皮實驗均表明類脂納米囊制劑可促進(jìn)羅哌卡因的經(jīng)皮滲透量。分別考察未處理皮膚、丙二醇溶液處理組及類脂納米囊制劑處理組皮膚的差示掃描量熱分析、組織病理切片、掃描電鏡，以探討類脂納米囊制劑促進(jìn)藥物滲透的作用機(jī)制。差示掃描量熱分析結(jié)果表明空白皮膚在208.22℃，283.96℃和324.63℃具有明顯的熱吸收峰，經(jīng)類脂納米囊制劑處理過的皮膚吸收峰強(qiáng)度

9、減弱，相比空白皮膚的焓變值(Enthalpy value/J·g-1)20.37，經(jīng)制劑處理過的皮膚樣品的焓變值為5.02，說明經(jīng)制劑處理過的皮膚樣品吸收較少能量即可改變其結(jié)構(gòu)，證明角質(zhì)層之間結(jié)構(gòu)變疏松。組織病理切片、掃描電鏡結(jié)果顯示未經(jīng)處理的皮膚角質(zhì)層結(jié)構(gòu)致密，角質(zhì)細(xì)胞扁平，細(xì)胞與細(xì)胞之間連接緊密。經(jīng)制劑組處理的皮膚，角質(zhì)層細(xì)胞間隙明顯增大，排列疏松，說明類脂納米囊制劑可以疏松角質(zhì)層結(jié)構(gòu)，削弱其屏障作用，從而促進(jìn)藥物的經(jīng)皮滲透。

10、>　　5.藥效學(xué)實驗
　　建立動物疼痛模型，采用醋酸扭體法對制劑的藥效學(xué)進(jìn)行初步評價。結(jié)果表明空白組的平均扭體潛伏期為4.02±0.79 min，15 min內(nèi)扭體次數(shù)為41.5±16.2次，給予羅哌卡因丙二醇溶液動物平均扭體潛伏期為10.50±0.33 min，扭體次數(shù)為10.5±2.6，相比空白組減少74.7％。給予類脂納米囊制劑的實驗組動物平均扭體潛伏期為13.90士1.12min，扭體次數(shù)為3.6士2.12，相比空白組減少