GPR30對人類絨毛滋養(yǎng)細胞的侵襲性影響及其與子癇前期發(fā)病關系的機制研究.pdf

1、目的：探討GPR30在人類胎盤中的表達，研究其對人類絨毛滋養(yǎng)細胞侵襲性的影響，及其與子癇前期發(fā)病的關系。
　　方法：應用免疫組化檢測早孕期絨毛、正常產婦胎盤和重度子癇前期患者胎盤組織中GPR30的表達。以常氧和缺氧復氧環(huán)境分別模擬正常和子癇妊娠狀態(tài)，用17-β-雌二醇（17β-E2）、GPR30激動劑 G1和阻滯劑 G15預處理體外培養(yǎng)絨毛組織和人絨毛外滋養(yǎng)細胞株HTR8/SVneo。顯微鏡下觀察體外絨毛組織滋養(yǎng)細胞生長侵襲范圍，

2、 Transwell侵襲實驗檢測HTR8/SVneo細胞侵襲能力。免疫熒光法檢測絨毛組織和 HTR8/SVneo細胞中 GPR30蛋白表達情況。Western blot法檢測HTR8/SVneo細胞中GPR30和MMP-9蛋白表達。RT-PCR技術檢測細胞中GPR30、MMP9及MMP2 mRNA。
　　結果：（1）GPR30在早期絨毛組織和正常末期胎盤滋養(yǎng)細胞上都有表達，且早孕期的表達水平高于正常末期胎盤，但在重度子癇前期胎盤上

3、GPR30蛋白表達明顯減少；（2）E2及GPR30激動劑G1可增加滋養(yǎng)細胞的侵襲能力，阻滯劑 G15則可下調其侵襲性,H/R嚴重損害滋養(yǎng)細胞的侵襲能力；（3）E2、G1可誘導滋養(yǎng)細胞GPR30蛋白表達上調，而G15則下調其表達。H/R使GPR30蛋白明顯下調。（4）GPR30蛋白水平與侵襲相關蛋白MMP-9表達水平有相關性。（5）各實驗組之間在GPR30、MMP9和MMP2的mRNA表達水平上未見明顯差異。
　　結論：GPR30參