不同倍性鯽鯉相關(guān)分子生物學(xué)特征研究.pdf

1、分類號(hào)學(xué)校代碼1 0 5 4 2密級(jí)學(xué)號(hào)—墊0 9 2 1 4 1 1 0 1 8不同倍性鯽鯉相關(guān)分子生物學(xué)特征研究S t u d y o n R e l a t e d M o l e c u l a r B i o l o g yo fD i f f e r e n t P l o i d yC y p r i n i d s研究 生姓名指導(dǎo)教師姓名、職稱學(xué) 科 專 業(yè)研 究 方 向湖南師范大學(xué)學(xué)位評(píng)定委員會(huì)辦公室二零一二年六月摘

2、要通過紅鯽( 旱) ( C a r a s s i u s a u r a t u s r e d v f l r ．) 和鯉魚( 杏) ( C y p r i n u sc a r p i oL ．) 屬問遠(yuǎn)緣雜交，在其后代成功培育出了異源四倍體鯽鯉群體，目前已繁殖了1 9 代( F 。一F 2 ，) 。該群體兩性可育，遺傳性狀穩(wěn)定，為探討魚類多倍體的形成提供了重要研究模型，為多倍體進(jìn)化的相關(guān)遺傳和表觀遺傳研究提供了良好的實(shí)驗(yàn)材料。以

3、雄性異源四倍體鯽鯉與雌性二倍體日本白鯽( C a r a s s i u sc u v i e r i ) 的倍性雜交形成了不育的三倍體湘云鯽。該三倍體、四倍體魚的形成為開展不同倍性魚的生物學(xué)比較研究提供了重要的生物學(xué)平臺(tái)。不改變D N A 序列而能影響生物體基因表達(dá)與表現(xiàn)型的表觀遺傳效應(yīng)，對(duì)雜交多倍體生物的形成與進(jìn)化適應(yīng)具有重要的調(diào)控作用。D N A 甲基化是表觀遺傳調(diào)控的最主要方式，進(jìn)行異源四倍體鯽鯉及其親本，紅鯽和鯉魚的D N A

4、 甲基化研究，探討異源四倍體魚與親本相比所發(fā)生的D N A 甲基化模式的變化，甲基化水平增加或降低的程度，甲基化對(duì)相關(guān)序列的修飾等內(nèi)容，有助于了解雜交四倍體魚形成所經(jīng)歷的表觀遺傳效應(yīng)。另外，在已有的有關(guān)不同倍性魚育性研究的基礎(chǔ)上，本文開展了促性腺激素F S H 和L H 的兩類旁分泌調(diào)節(jié)物質(zhì)，活化素A c t i v i n及卵泡抑素F o l l i s t a t i n 基因的分子克隆及序列分析，為進(jìn)一步從遺傳學(xué)角度探討三倍體湘云

5、鯽不育和四倍體鯽鯉可育的機(jī)制奠定了基礎(chǔ)。本論文的研究結(jié)果如下：1 ．利用甲基化敏感擴(kuò)增多態(tài)性( M S A P ) 方法分析了紅鯽、鯉魚和異源四倍體鯽鯉的D N A 胞嘧啶甲基化模式。根據(jù)條帶的位置和有無(wú)情況，顯示在變性聚丙烯酰胺凝膠上的甲基化條帶呈4 種不同模式：非甲基化( C C G G ) 模式；內(nèi)胞嘧啶全甲基化( C m C G G ) 模式；外胞嘧啶半甲基化( m C C G G ) 模式；還有一種模式在M s p I 和H